葡萄废弃材料多酚物质的含量研究

葡萄废弃材料多酚物质的含量研究

汪成东[1]2004年在《葡萄废弃材料多酚物质的含量研究》文中研究说明本文从温度、时间、溶剂选择和多酚氧化酶等影响葡萄植株多酚提取的主要因素方面研究多酚提取和分离方法,并对葡萄植株多酚粗提液进行分析及抗氧化试验,结果表明试验所用提取和分离方法可行,可以很好的保存其生物活性,适用于常规的试验研究。本研究得到以下结论:1、葡萄植株多酚提取和分离的工艺路线有机溶剂萃取法:利用多酚物质在不同溶剂中的溶解度不同,将多酚与其他物质分离的方法。基本的工艺路线:材料→前处理→酒精提取→氯仿萃取→乙酸乙酯萃取→减压蒸馏→含量测定。2、葡萄植株多酚含量的年变化在葡萄年生长期间,供试4个葡萄品种多酚含量均是新梢最高,且含量呈双S型变化,都有两个高峰;葡萄叶片内多酚含量呈现不明显的双S型变化,含量很低;卷须内多酚的含量基本不随季节变化,且含量最低。供试4个葡萄品种之间,新梢和卷须的多酚含量不存在显着性差异,而叶片中的多酚含量存在显着性差异。对各品种器官之间多酚含量进行方差分析,结果表明,新梢多酚含量与叶片和卷须的多酚含量存在极显着性差异。3、葡萄与葡萄酒中主要单体酚的HPLC分析对于葡萄与葡萄酒中的多酚物质的检测可采用VP-ODS C18柱,甲醇∶水为流动相,进样量为10μL,流速1mL/min,检测波长280nm,通过改变甲醇的浓度(0min,30%;15min,35%;25min,35%;25min,stop)能很好的分离(±)-儿茶素、芦丁、槲皮素和咖啡酸4种酚类物质,各单体酚浓度在7.8~1000mg/L范围内有很好的线性关系(R﹥0.99213)。混合样品中4种单体酚可同时检出的最小浓度为7.8mg/L。4、利用葡萄修剪枝条提取分离多酚的可行性近几年来,我国的葡萄与葡萄酒行业发展很快,葡萄栽培面积逐年增加。葡萄每年的修剪抛弃许多枝条(542Kg/亩),造成环境的污染和资源的大量浪费。经粗略计算,从1000亩葡萄园中收集修剪枝条,每年可生产多酚1.328吨。多酚物质是高效天然抗氧化剂,在日用化工、药物及食品添加剂等方面有着广泛的应用,本研究有助于实现葡萄多酚的工业化生产,对多酚应用的深度和广度具有推动作用。

任静[2]2005年在《苹果多酚类物质的提取分离及活性研究》文中研究指明为了充分利用废弃苹果渣,开发多酚物质原花青素的植物资源,我们主要以苹果渣为材料,确立了苹果渣中原花青素的提取条件及分离方法,同时测定了苹果不同部位及不同成熟度时总酚和原花青素的含量。在活性研究中以苹果多酚为样品与常用抗氧化剂作对比,测定其对猪油的抗氧化性的大小;以从果渣中分离出的原花青素为样品与常用清除剂作对比,测定其对自由基的清除率大小。为苹果多酚作为抗氧化剂应用于食品、药品及化妆品等行业提供了理论依据。 1.确定了苹果中总酚和原花青素含量测定的方法,测定出总酚含量的高低为:幼果>鲜果果皮>干果渣>鲜果肉,原花青素含量的高低为:鲜果果皮>干果渣>鲜果肉>幼果。 2.以干果渣为原料,60%丙酮为提取溶剂,用正交试验的方法确定出原花青素的最佳提取工艺为10倍量60%丙酮40℃热回流提取3次,每次4小时。 3.采用溶剂萃取法和聚酰胺柱层析法分离原花青素,结果前者得率为0.0342%,其纯度为34.2%;聚酰胺层析法原花青素的得率为0.0225%,纯度为43.95%。虽然聚酰胺层析法得率较低,但纯度较高,有利于进一步的分离纯化。 4.对于苹果各部位多酚的抗氧化活性研究表明其抗氧化性大小为:干果渣>鲜果果皮>幼果>鲜果肉。 5.同其它抗氧化剂相比,其抗氧化性大小为:TBHQ>果渣多酚>茶多酚>BHT=V_E 6.果渣多酚的添加量不是越多越好,它存在一个抗氧化—助氧化的平衡浓度0.08%,低于此浓度,果渣多酚表现抗氧化性,高于此平衡浓度时表现出助氧化性。 7.在抗氧化性实验中果渣多酚配合Vc一起使用,能起到一定的增效作用。 8.在原花青素对O_2~-自由基的清除研究中发现:果渣中原花青素的浓度与清除率之间量效关系显着,半清除率浓度SC_(50)约为6ug/ml。 9.在原花青素对·OH自由基的清除研究中发现:其清除效果也与其浓度有一定的关系,但清除效果没有对O_2~-的清除效果好,SC_(50)约为0.05mg/ml。

高园[3]2009年在《葡萄成熟枝条中多酚类物质提取及分离纯化方法的研究》文中研究表明多酚类物质是植物在生长发育中的次生代谢产物,广泛存在于植物的根、茎、皮、叶及果实内。多酚类物质具有清除自由基和抗氧化等生物活性,在抑菌、抗病毒、防癌抗癌、抑制肿瘤、防治心血管疾病等方面具有良好功效。葡萄因其组织和器官中富含多酚类物质而越来越受到关注。目前,关于葡萄废弃物中多酚类物质的研究主要集中在皮渣和葡萄籽上,尚未见对废弃枝条中多酚类物质的深入研究。因此,利用葡萄园废弃材料进行多酚类物质的相关研究,将对我国葡萄与葡萄酒产业的可持续发展产生积极的推动作用。本研究以葡萄成熟枝条为原料,采用超声波辅助有机溶剂提取法提取、大孔树脂柱层析法分离纯化其中的多酚类物质,建立了一套简单易行的葡萄枝条多酚类物质提取、分离纯化方法,并对56个葡萄品种枝条中的多酚类物质进行了测定。本试验主要研究内容如下:1.探讨利用辅助超声技术从葡萄枝条中提取多酚类物质的最佳工艺条件,并比较56个葡萄品种枝条中多酚类物质含量差异。对影响葡萄枝条中多酚提取率的乙醇溶液体积分数、浸提温度、料液比(质量(g)与体积(ml)比)、提取时间和提取次数进行了单因素试验,并在此基础上设计了四因素叁水平的正交试验,以确定超声波提取的最佳工艺条件;利用最佳工艺条件提取并测定了56个葡萄品种枝条中的多酚物质含量。研究结果表明:超声波辅助提取葡萄枝条中多酚的最佳条件为:以体积分数60 %乙醇溶液为提取液,料液比为1:12,超声提取每次30 min,20℃下浸提2次; 56个葡萄品种测定结果显示,多酚类化合物含量在20 mg·g~(-1) ~ 38 mg·g~(-1)之间。且通过差异显着性分析发现,欧美杂种中很多品种之间差异不显着,欧亚种中很多品种之间差异也不显着。2.筛选适合分离纯化葡萄枝条中多酚类物质的大孔树脂并确定其分离纯化条件。选择11种型号的大孔树脂,通过静态吸附试验比较其对多酚类物质的静态吸附及解吸效果,筛选出较好的大孔吸附树脂;并通过动态吸附试验测定其泄漏点、饱和点并确定洗脱方式。研究结果表明:通过静态吸附和动态吸附试验发现,在粗提液浓度为0.7223 mg·mL~(-1)的条件下,ME~(-1)型号大孔树脂具有最佳的吸附及解吸性能,其静态吸附量、吸附率和解吸率分别为33.10 mg·g~(-1)、86.31 %和95.69 %;在上样流速为2 mL·min~(-1)的条件下,其泄漏点及饱和点分别为250 mL和3000 mL。对于饱和吸附的层析柱,在洗脱流速为2 mL·min~(-1)的条件下,蒸馏水洗脱多糖的用量为150 mL,洗脱蛋白的用量为1300 mL。体积分数为75 %的乙醇溶液对多酚类物质有较好的洗脱效果。洗脱曲线显示:解吸峰集中、对称,拖尾现象不明显,且多酚类物质主要集中在20 ~ 50 mL洗脱液中。

白姗姗[4]2017年在《啤酒花废弃枝叶的化学成分分析及活性研究》文中认为新疆是啤酒花种植的重要产区,每年都会产生大量的废弃枝叶,造成了环境污染、资源浪费。啤酒花废弃枝叶中含有丰富的营养成分,如果能充分利用这些农副产品,不仅对啤酒花产业的良性发展起到积极作用,还可促进新疆经济的发展。论文以新疆普遍种植的香型花札一和高α-酸型花马可波罗的废弃枝叶为原料,分析比较了其主枝、侧枝和叶子中的主要化学成分,并优化了其中黄酮、多酚的提取工艺;研究啤酒花枝叶提取物的抗氧化和抑菌活性,并通过直接紫外分光光度法和高效液相色谱法分析其中的原花青素。主要内容如下:分析了札一和马可波罗啤酒花主枝、侧枝和叶子中总黄酮、总多酚、总氮、粗脂肪、矿物元素等化学成分的含量,结果表明,啤酒花枝叶中总多酚、总黄酮、总糖、总氮等化学成分含量较高,其中总多酚和总氮的含量可高达3.31%和20.82%。对样品枝叶中27种矿物元素的分析表明,矿物元素的含量在不同啤酒花品种及同一品种的主枝、侧枝和叶子中存在差异,整体而言,叶子中的营养元素含量高于枝干(主枝和侧枝)。与常见动物饲料相比,啤酒花枝叶中含有丰富的总氮、脂肪等常规营养成分和Fe、Mn、Co、Ca、Mg等生物体必需的矿物元素,具有较高的营养价值,在开发新型植物性饲料方面有很大的应用前景。优化了啤酒花枝叶中活性成分黄酮、多酚的提取工艺条件,获得最佳工艺参数:提取时间60 min、提取温度60℃、乙醇体积分数50%、料液比1:30,在最佳的工艺条件下,黄酮、多酚的含量分别为:2.81±0.02 mg/g、11.91±0.14 mg/g;采用不同极性的有机溶剂(氯仿、乙酸乙酯和正丁醇)对札一和马可波罗啤酒花废弃枝叶的乙醇提取物进行初步分离并测定黄酮、多酚的含量。结果表明,经萃取后活性成分黄酮、多酚在乙酸乙酯相得到有效富集,说明啤酒花枝叶提取物主要以极性较低的黄酮苷元类物质为主。采用不同极性的有机溶剂对札一和马可波罗啤酒花废弃枝叶的乙醇提取物进行初步分离,以·OH、DPPH·、β-胡萝卜素-亚油酸和磷钼酸四个不同的抗氧化活性评价体系对不同极性部位提取物的抗氧化活性进行评价;以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为供试菌种评价了样品的抑菌活性,并与提取物中黄酮、多酚含量进行相关性分析。结果表明,乙醇提取物及各极性部位均具有一定的抗氧化和抑菌活性,其中乙酸乙酯提取物的活性均高于乙醇提取物。相关性分析表明,除个别样品外,其抗氧化活性和抑菌活性与其黄酮、多酚含量的相关系数均大于0.500,说明黄酮和多酚是啤酒花枝叶抗氧化和抑菌作用的主要物质基础。通过直接紫外分光光度法和高效液相色谱法分析了啤酒花枝叶提取物中的原花青素。以原花青素紫外对照品、原花青素B1和原花青素B2分别为标准品计算所得的原花青素含量存在差异,说明紫外法分析原花青素含量时,样品中原花青素单体的组成成分不同,对分析结果有影响。通过高效液相色谱法对样品提取物的原花青素B1、原花青素B2和儿茶素进行了定量分析。结果表明,样品中的原花青素经乙酸乙酯和正丁醇萃取后已完全分离,且在乙酸乙酯相得到有效富集,原花青素B1、原花青素B2和儿茶素的含量分别为:78.26~215.51 mg/g、原花青素B2、90.04~250.77 mg/g、58.41~165.87 mg/g。

孙玉霞[5]2011年在《葡萄藤茎中多酚物质提取及其抗氧化能力的研究》文中指出葡萄是多年生藤本植物,每年都有大量修剪下的藤茎被废弃焚烧掉。本文以开发利用葡萄栽培管理过程中的废弃资源为目的,以冬季修剪的葡萄藤茎为试材,优化了多酚物质的提取条件;对其中的多酚类物质进行了定性、定量分析;研究了葡萄藤茎提取液对二苯代苦味酰肼自由基(DPPH·)的清除能力。主要包括以下内容:以总酚含量为考察指标,通过溶剂对比实验和单因素实验确定了最佳提取溶剂及影响多酚提取率的主要因素,并在此基础上采用正交试验法和响应面分析两种试验设计相结合的方法,优化了最佳提取工艺条件:以乙醇为溶剂,提取温度60℃、料液比1:16.5、乙醇溶液浓度50%、提取时间1小时。据此提取条件测定了2种土壤条件下、5个品种的葡萄藤茎中总酚、总黄酮、单宁、白藜芦醇以及没食子酸、儿茶素、表儿茶素、咖啡酸、阿魏酸和对香豆酸的含量,其中总酚含量13.89 mg/g~23.30 mg/g,总黄酮含量153.93~263.00μg/g,单宁含量7.97~12.69 mg/g,白藜芦醇含量15.27-91.63μg/g,没食子酸13.80~26.19μg/g,其他5种单体酚未全部检出。单宁是含量最高的组分,各品种间多酚类物质的含量存在显着性差异,而且沙砾土中的各组分含量均高于壤土中的。研究了5个品种葡萄藤茎提取液对DPPH自由基的清除能力,结果表明品种间的差异性显着,且自由基的清除能力与总酚、总黄酮及单宁的含量均呈正相关性。对葡萄藤茎提取液和二丁基羟基甲苯(BHT)及抗坏血酸的自由基清除能力进行了对比研究,葡萄藤茎提取液对DPPH自由基的清除能力远高于相当浓度的BHT对DPPH自由基的清除能力,但较相当浓度的抗坏血酸略低。

杜运平[6]2011年在《板栗苞植物多酚提取、纯化及其应用研究》文中研究表明植物多酚是分子中有多个羟基酚类植物成分的总称,是一类广泛存在于植物体内的多酚类物质。随着对多酚的研究越来越深入,植物多酚在医学、食品、制革工业、日用化工等方面应用越来越广,用量也越来越大,传统的多酚资源明显不足,需要开发新的多酚原料物质资源,而板栗苞含有大量的多酚物质(大约含有18 %),同时我国是板栗生产大国,产量居世界首位,通常板栗苞都白白废弃,不仅造成资源浪费,还污染环境。若能充分利用板栗苞这一废弃物,既能获得经济效益、生态效益和社会效益,又能促进板栗产业的良性发展,对我国农业经济的发展具有深远意义。本研究以板栗苞为原料,采用醇水溶液为提取剂获得板栗苞多酚,然后采用膜分离技术提高其纯度,最后用板栗苞多酚进行了沉锗试验,获得了最佳工艺条件。具体研究如下:1选择以通常废弃板栗苞为原料,以乙醇水溶液为提取剂进行了板栗苞多酚的提取。建立了多酚的分析方法,绘制了工作曲线,确定了曲线方程,列出了提取率的计算方法。通过对提取剂种类、提取温度、提取时间、提取剂浓度和料液比等单因素对其多酚物质提取效果的影响,并通过正交试验确定了从板栗苞中提取多酚物质的最优方案,得到了最佳提取工艺条件如下:用40 %乙醇水溶液,料液比为1:20,在温度为80℃的水浴中浸提120 min。在此工艺条件下进行试验的平均提取率(以板栗苞含酚总量为基准)可达71.28 %。由此可见,从板栗苞中提取多酚物质是可行的。2采用膜分离技术提高板栗苞多酚的纯度。选用聚砜中空纤维膜作为分离介质,通过对膜面流速、膜面压力、操作温度和膜孔径等单因素对膜通量的影响的研究,通过正交试验考察了膜孔径、膜面流速及操作温度对膜通量的影响,确定了最佳工艺条件如下:飓风中空纤维膜截留相对分子质量为10000时,膜面流速为2.0 m/s,操作温度为40℃,跨膜压力为0.2 MPa。在此工艺条件下进行实验可将板栗苞多酚含量提高至64 %左右,该方法为进一步开发板栗苞多酚生产工艺提供了技术参考。3进行了板栗苞多酚应用研究,通过络合沉淀法对板栗苞多酚进行了络合沉锗研究。建立了锗的检测方法,在其最大吸收波长下建立了工作曲线,确定了曲线方程,得出根据吸光度确定锗含量的计算公式。通过单因素实验考察了反应pH值、多酚用量和硫酸锌含量对络合沉锗率的影响,并通过正交试验考察了这叁个因素对实验的影响,确定了最佳工艺参数如下:反应pH值为2.5,络合剂用量为锗含量的36倍,硫酸锌含量为110 g·L~(-1)。在此条件下反应30 min沉锗率小试可达99.0 %,生产实验可达98.6 %以上。在相同沉锗率的基础上同传统的单宁酸相比较,应用板栗苞多酚,大大节约了生产成本。

韩静[7]2008年在《葡萄酒香气成分分析及葡萄籽抗氧化成分研究》文中提出本文讨论了葡萄酒的酿造技术要点并对相关的理化指标、感官指标进行了测定;运用顶空固相微萃取(Solid Phase Microextractio.SPME),气相色谱-质谱(GC-MAS)联用技术对葡萄酒的香气成分进行了测定;以葡萄酒发酵后废弃的葡萄籽为原料对其有效抗氧化成分进行了研究。对同一工艺条件下,以不同品种葡萄为原料酿造的成品酒和自制酒从理化指标、感官评定两个方面进行对比,结果显示葡萄酒的品质主要由酿酒葡萄的质量决定,工艺次之;在对甘肃、宁夏、新疆叁地的成品酒进行对比后得到甘肃产葡萄酒质量最优。对葡萄酒挥发性香气成分进行了测定,结果表明同一地域不同品种葡萄酿造的酒,香气主要成分基本相同,在此基础上有各自的香气特点;不同地域同一品种葡萄酿造的酒,香气成分有明显差异,得到结果地域的差异是葡萄酒香气差异的主要来源,品种次之;酒和葡萄果实之间的香气有共同点,表明葡萄酒挥发性香气成分来源之一是果香。索氏抽提法提取出葡萄籽中油脂,将其加入到菜子油中进行抗氧化实验,对过氧化值和酸价进行测定,结果表明葡萄籽油的抗氧化效果明显;用乙醇浸提葡萄籽中的多酚类物质,对其抗氧化性能进行研究,结果表明葡多酚有很强的还原能力,并且可以有效的清除羟自由基和超氧阴离子。

任梦梦[8]2017年在《基于皮籽控制酿造红葡萄酒中酚类物质及与蛋白质相互作用的研究》文中提出葡萄酒富含酚类物质,多酚不仅影响葡萄酒的颜色、涩感、苦味等感官性质,也会影响其生理效应。作为酿造葡萄酒的基本原料,葡萄的品质决定着葡萄酒质量的优劣。为了改善部分产区中由于葡萄自身品质问题所造成葡萄酒多酚含量低,口感寡淡,香气不浓郁等质量差的状况,本研究创建了一种通过控制皮籽比例来改善葡萄酒品质的工艺技术,分析了不同皮籽比例所酿造葡萄酒的颜色、酚类物质的组成与含量,并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法和荧光光谱法分析了葡萄酒多酚与蛋白质的结合反应,得出如下主要结论:1.建立了一种通过控制皮籽比例来改善葡萄酒品质的工艺技术,所得葡萄酒的基础指标(残糖,酒精度,残留SO2及总酸),均符合国家相关标准。运用新工艺通过调整皮籽的比例,可以成功地改善传统工艺下葡萄酒酚类物质低的缺陷。2.测定了新工艺酿造葡萄酒的颜色及酚类物质的含量。结果表明,增加皮的比例,可以显着增加葡萄酒的色调角H值,即葡萄酒颜色更接近红色,同时可以显着增加葡萄酒中总花色苷的含量。籽比例的多少主要影响葡萄酒中总黄烷醇含量。3.不同皮籽比例葡萄酒的HPLC数据显示,增加皮比例可以增加葡萄酒中白藜芦醇、黄酮醇以及对羟基肉桂酸的含量;增加籽比例可以增加葡萄酒中儿茶素等黄烷醇类单体酚物质。4.通过C18固相萃取小柱,将葡萄酒中的酚类物质,按照聚合度的差异分为叁个组分,结果表明,通过改变皮籽比例之后,酚酸含量都下降,高聚物含量增加,皮处理组增加的幅度更大;改变籽的比例对于低聚物质含量影响不大,皮比例的增加使得低聚物含量降低。5.通过聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳法、荧光光谱法研究了葡萄酒多酚和蛋白质的相互作用。随着酿造过程中皮比例或籽比例的增加,葡萄酒中的多酚与蛋白质的结合程度更大,可能造成葡萄酒的涩感强度更大,多酚组分F1、F2、F3中F3与蛋白质的结合强度是最大的,而且皮比例高的葡萄酒,其高聚物F3与蛋白质结合的能力最强。

高学峰[9]2016年在《利用葡萄与葡萄酒生产过程中废弃物栽培杏鲍菇的研究》文中指出葡萄园整形修剪以及葡萄酒酿造过程中产生大量的废弃物,如葡萄枝条、皮渣等,这些废弃物极少被再利用,大部分被随意堆放或焚烧,造成资源浪费和环境污染。本研究以葡萄修剪枝条、葡萄皮渣为主要栽培料,通过比较不同品种的葡萄枝条,以及不同皮渣替代比例对杏鲍菇栽培的研究,探索其栽培杏鲍菇的最优配方,进而使葡萄以及葡萄酒废弃物栽培食用菌的技术规范得以推广。研究结果表明:(1)以维多利亚、户太八号、乍娜叁个鲜食品种的葡萄枝条为主要栽培料,辅以麸皮、豆粕、玉米粉等栽培杏鲍菇。观察菌丝生长情况发现,维多利亚葡萄枝条栽培料菌丝长势强,生命力旺盛,菌丝日均长速20.6mm/d,明显高于户太八号、乍娜栽培料。维多利亚、户太八号、乍娜的栽培料生物学转换率差异性不显着。杏鲍菇进行营养成分分析发现:叁种葡萄枝条栽培的杏鲍菇,其粗脂肪含量差异性不显着,维多利亚枝条栽培杏鲍菇的粗脂肪含量,略高于其它处理,含量为0.94%。粗蛋白、粗灰分含量差异显着,维多利亚栽培杏鲍菇的粗蛋白、粗灰分含量分别为为2.81%、0.83%,显着高于其他处理组。户太八号、乍娜葡萄枝条栽培的杏鲍菇,其粗蛋白、粗灰分含量差异性不显着。叁种葡萄枝条栽培杏鲍菇的粗纤维含量差异显着,维多利亚处理组的粗纤维含量最高为3.01%,显着高于其他处理组。综合比较,维多利亚枝条栽培的杏鲍菇的营养成分较高。(2)葡萄皮渣按照一定的比例,代替葡萄枝条添加到培养基中,替代比例分别为0、20%、40%、60%、80%、100%。随着皮渣替代比例的增加,菌丝生长速度变慢,菌丝日均长速减小,菌丝满袋天数增多。杏鲍菇进行营养成分分析得知:随皮渣添加比例的增加,其粗蛋白、粗脂肪含量逐渐增多,粗纤维含量逐渐降低,皮渣添加比例为80%的处理组,其含量依次为4.47%、0.33%、4.09%。皮渣添加比例为80%的处理组,其杏鲍菇营养价值最高,口感最好。随着皮渣替代比例的增加,杏鲍菇中矿质元素Mg、Mn、Cu的含量逐渐增多,矿质元素Ca的含量减少。皮渣添加比例为80%的处理组,其Mg、Mn、Cu含量最高,依次为212.7%、1.49%、2.80%。未添加皮渣的栽培组,其Ca的含量最高为6.34%。此外,总氨基酸的含量与皮渣添加比例呈现正相关。

孙立军[10]2013年在《苹果幼果总酚、绿原酸及根皮苷的连续分离及对淀粉酶的抑制》文中研究表明从苹果幼果中提取分离苹果多酚,在8种大孔树脂中,X-5树脂具有最高的吸附能力和解吸率。针对X-5树脂,对于溶液的pH值、进样液中多酚的浓度、洗脱剂、吸附曲线分别进行了研究,经过一次解吸和吸附过程后,苹果幼果多酚产品的纯度为由35.17%提高到74.64%,回收率为89.35%,绿原酸和根皮苷分别用X-5树脂和聚酰胺树脂进行分离纯化,最终,绿原酸的纯度为15.20%,回收率为89.16%,而根皮苷的纯度为97.52%,回收率为64.95%。实验结果表明,本文提供的分离纯化方法可以实现大规模工业生产。经过连续洗脱纯化,共得到4种多酚组分,分别为苹果幼果总多酚、30%乙醇洗脱物、70%乙醇洗脱物及根皮苷。分别研究这4种组分对人唾液a-淀粉酶的抑制活性,结果显示,总酚和30%乙醇洗脱物对α-淀粉酶具有较强的抑制活性,而70%乙醇洗脱物和根皮苷对α-淀粉酶的抑制活性较弱。为了研究总酚和30%乙醇洗脱物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制能力,分别测定了这两种组分对两种碳水化合物水解酶的半数抑制浓度(IC50)及对酶的最大抑制能力,并与药用阿卡波糖进行了比较。结果显示,总酚和30%乙醇洗脱物能较强地抑制唾液α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的活性,30%乙醇洗脱物对α-淀粉酶的半数抑制浓度为67.0726±4.12μg/mL,比阿卡波糖的半数抑制浓度(12.34±1.57μg/mL)大,而其对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度为42.68±3.47μg/mL,约为阿卡波糖的一半(88.53±4.19μg/mL)。酶促反应的动力学结果显示,30%乙醇洗脱物是α-淀粉酶的竞争型抑制剂,酶促反应的最大反应速率保持在6.17×10-4M/min左右。在30%乙醇洗脱物中对水解酶有抑制作用的活性物质为绿原酸,低聚原花青素,可溶性单宁等物质。以上结果显示苹果幼果多酚类物质中,30%乙醇洗脱物是一种碳水化合物水解酶潜在的抑制剂,可以用于制药工业来治疗或预防糖尿病。

参考文献:

[1]. 葡萄废弃材料多酚物质的含量研究[D]. 汪成东. 西北农林科技大学. 2004

[2]. 苹果多酚类物质的提取分离及活性研究[D]. 任静. 西北大学. 2005

[3]. 葡萄成熟枝条中多酚类物质提取及分离纯化方法的研究[D]. 高园. 西北农林科技大学. 2009

[4]. 啤酒花废弃枝叶的化学成分分析及活性研究[D]. 白姗姗. 新疆大学. 2017

[5]. 葡萄藤茎中多酚物质提取及其抗氧化能力的研究[D]. 孙玉霞. 山东大学. 2011

[6]. 板栗苞植物多酚提取、纯化及其应用研究[D]. 杜运平. 中国林业科学研究院. 2011

[7]. 葡萄酒香气成分分析及葡萄籽抗氧化成分研究[D]. 韩静. 甘肃农业大学. 2008

[8]. 基于皮籽控制酿造红葡萄酒中酚类物质及与蛋白质相互作用的研究[D]. 任梦梦. 陕西师范大学. 2017

[9]. 利用葡萄与葡萄酒生产过程中废弃物栽培杏鲍菇的研究[D]. 高学峰. 西北农林科技大学. 2016

[10]. 苹果幼果总酚、绿原酸及根皮苷的连续分离及对淀粉酶的抑制[D]. 孙立军. 陕西师范大学. 2013

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