结构匹配酞菁缔合物红区荧光探针在纳克级肝素测定中的应用

论文摘要

肝素是一种聚阴离子生物活性多糖,具有重要的临床价值,简便快速、特异性高的分析方法的研发一直受到重视。基于分子缔合作用原理,构建了酞菁离子缔合物荧光探针,并籍此建立了肝素高特异、高灵敏的荧光分析新方法,分析浓度可达纳克级。发射强红色荧光的四磺基铝酞菁（AlS4Pc）是一种带负电的金属酞菁荧光化合物,研究发现,母体结构相同、荷电相反的阳离子铜酞菁化合物阿利新蓝（Alcian blue 8 GX）对AlS4Pc具有高效荧光猝灭作用。由于二者均具有大平面的酞菁母体,但电性相反,分子结构有着高度的匹配性,易于通过静电作用、平面疏水作用等分子间力而形成强的缔合作用,生成近乎无荧光的缔合物。据此现象构建了AlS4Pc-Alcian blue 8 GX缔合物荧光探针。进一步的糖类物质考察、筛选实验显示,具有强负电性的阴离子生物多糖可以使AlS4Pc-Alcian blue 8 GX缔合体系的荧光发生不同程度的恢复,重新发出AlS4Pc的荧光,其中尤以肝素存在下的荧光恢复行为最为显著,且恢复程度与肝素的浓度呈正相关。这是因为肝素带有大量磺酸根阴离子,对AlS4Pc构成强的竞争结合（Alcian blue 8GX）的作用,导致AlS4Pc从缔合体系中游离出来,体系荧光得以恢复。基于这一发现,研究建立了一种高灵敏、高特异性测定肝素的荧光增强分析法。考察了体系的分子光谱（荧光光谱和吸收光谱）行为以探讨缔合物形成和反应体系荧光恢复的作用机理;对反应参数（包括pH、反应温度、反应时间、 AlS4Pc以及Alcian blue 8 GX的用量等）进行了优化;在最佳条件下,方法的线性回归方程y=1.08x+58.62,工作曲线线性区间为6.0～600.0 ng·mL-1,检测限为5.7 ng·mL-1;提出了简便实用的样品前处理方法（极性有机溶剂沉淀分离法）以解决实际样品测定时存在偏差的问题;此外,较为全面地考察了多种类物质（常见阴、阳离子、小分子、表面活性剂及生物大分子）对肝素测定的干扰行为;本法应用于实际样品（肝素钠注射液）的测定,取得了较为满意的结果。开拓了酞菁类化合物作为分子光谱探针在分析科学中的应用。

论文目录

引言

1 实验部分

1.1 仪器

1.2 试剂

1.3 方法

2 结果与讨论

2.1 AlS4Pc和Alcian blue 8GX的分子结构与分子光谱性质

2.2 试验条件的优化

2.2.1 缓冲体系

2.2.2 反应时间的影响

2.2.3 反应温度

2.2.4 AlS4PC和阿利新蓝的用量

2.3 工作曲线

2.4 共存物质的干扰

2.5 不同测定方法的比较

2.6 样品测定

3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 周涛,杜光心,郑霄,张艳,黄萍,邓雅斌,李东辉

关键词: 酞菁,荧光,肝素,探针

来源: 光谱学与光谱分析 2019年04期

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 化学

单位: 厦门大学医学院抗癌研究中心

基金: 福建省属公益类科研院所基本科研专项重点项目(2017R1036-2)资助

分类号: O657.3

页码: 1109-1113

总页数: 5

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