导读:本文包含了铜锌超氧化物歧化酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:超氧化物,转录,心肌,文昌鱼,基因,蛋白,氯胺酮。
铜锌超氧化物歧化酶论文文献综述
孜拉吉古丽·西克然木,马纪,库尔班·吐松,刘小宁[1]（2019）在《小胸鳖甲胞外铜锌超氧化物歧化酶重组蛋白的原核表达及多克隆抗体制备》一文中研究指出超氧化物歧化酶(SOD)是清除生物体内超氧阴离子自由基的主要抗氧化酶家族。基于原核表达系统,成功表达了拟步甲科Tenebrionidae小胸鳖甲Micordera punctipennis胞外铜锌SOD的重组蛋白(本文定义为Trx-His-MpecCu/Zn-SOD)。经Ni~(2+)亲和层析法纯化重组蛋白后,研究了重组蛋白的部分酶学性质。通过足垫加皮下注射法3次免疫小鼠后,分别用ELISA和Western blot的方法检测抗体效价和抗体特异性。结果表明,重组蛋白主要以包涵体形式存在,纯化后的重组蛋白浓度为1.33 mg·mL~(-1),酶活力为27.52 U·mg~(-1)。Trx-His-MpecCu/Zn-SOD在25～45℃具有比较稳定的酶活性,在35℃最高,同时表现出比较广泛的酸碱耐受性(pH3～12),最适pH为9.0,表明重组蛋白的酶活性相对比较稳定。蛋白免疫法制备的鼠抗MpecCu/Zn-SOD多克隆抗体滴度高于1∶819 200。Western blot结果显示,该抗体能免疫结合重组蛋白Trx-His-MpecCu/Zn-SOD和小胸鳖甲体内天然MpecCu/Zn-SOD,但不能与黄粉虫Tenebrio molitor的总蛋白结合,说明制备的抗体效价较高且特异性较好。本研究结果为小胸鳖甲ecCu/Zn-SOD功能的深入研究奠定了基础。(本文来源于《四川动物》期刊2019年04期）
刘晓阳,刘凌志,李彤,汪建华,张惟材[2]（2018）在《人铜锌超氧化物歧化酶在大肠杆菌中的融合表达与纯化》一文中研究指出目的:在大肠杆菌中表达并纯化人铜锌超氧化物歧化酶(HuSOD1)。方法:合成HuSOD1编码基因,PCR扩增后连入pMAL-p5x质粒构建融合表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态,IPTG诱导表达,NBT法测定HuSOD1酶活,利用麦芽糖结合蛋白亲和层析柱纯化MBP-HuSOD1融合蛋白,经因子Ⅹa酶切及分子筛柱层析纯化HuSOD1蛋白。结果:构建了pMAL-p5x-HuSOD1表达载体,在大肠杆菌中实现了高表达,目的蛋白占全菌蛋白的30%,其中可溶性表达占63%,具有超氧化物歧化酶活性;通过亲和层析纯化得到纯度大于95%的融合蛋白MBP-HuSOD1,经因子Ⅹa酶切后纯化得到纯度约90%的HuSOD1蛋白。结论:在大肠杆菌中表达并纯化获得有活性的MBP-HuSOD1,经进一步酶切、纯化后得到HuSOD1。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2018年05期）
刘云财,苏航,王沛城,徐雅岚,魏天铖[3]（2018）在《桑螟胞外铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与融合表达及重组蛋白酶活性检测》一文中研究指出桑螟(Glyphodes pyloalis)是蚕区桑园的主要害虫之一,鉴定其抵御各种环境胁迫相关的基因,是制定防治新策略的重要理论依据。对桑螟幼虫转录组数据的分析中,发现桑螟胞外铜锌超氧化物歧化酶(ec Cu/Zn SOD)基因在应对高温胁迫时的表达量发生显着变化。为了明确ec Cu/Zn SOD在桑螟应对不良环境中发挥的作用,克隆和鉴定了其编码基因Gpec Cu/Zn SOD(Gen Bank登录号:MG566057)。Gpec Cu/Zn SOD基因的开放阅读框长726 bp,编码241个氨基酸,编码蛋白质序列与脐橙螟(Amyelois transitella)的一种SOD蛋白基因(Gen Bank登录号:XP_013197347.1)编码氨基酸序列的一致性高达83%。采用邻近相接法构建桑螟与其他昆虫的Cu/Zn SOD系统发生树,结果显示Cu/Zn SOD被分为ec Cu/Zn SOD和ic Cu/Zn SOD两类,主要是随物种进化而进化。采用半定量RT-PCR检测不同温度处理桑螟5龄幼虫的Gpec Cu/Zn SOD基因表达情况,结果显示幼虫体内的Gpec Cu/Zn SOD在高温(40℃)和低温(4℃)条件下表达量最高。构建p Cold-Gpec Cu/Zn SOD重组表达质粒,并在大肠埃希菌中实现异源表达。利用镍柱亲和层析法分离纯化重组Gpec Cu/Zn SOD蛋白,采用WST-1法测定重组Gpec Cu/Zn SOD蛋白在40℃时的酶活性最高,并且经60~70℃处理后仍然具有较高的酶活性。采用牛津杯法分析重组Gpec Cu/Zn SOD的抗氧化活性表明:过表达Gpec Cu/Zn SOD的大肠埃希菌抗氧化的能力显着增强,显示Gpec Cu/Zn SOD具有较强的抗氧化功能。研究结果暗示Gpec Cu/Zn SOD在桑螟应对高温胁迫过程中发挥着重要作用。(本文来源于《蚕业科学》期刊2018年02期）
王宇,刘菊英,王贤裕,柯昌斌,李瑞明[4]（2018）在《蛋白转导结构域4-铜/锌-超氧化物歧化酶融合蛋白的制备及其穿细胞膜的功能研究》一文中研究指出目的拟构建蛋白转导结构域(PTD)4-铜/锌-超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)原核表达质粒,纯化制备PTD4-Cu/ZnSOD融合蛋白,探讨其穿膜能力。方法设计合成hCu/ZnSOD引物,扩增hCu/ZnSOD cDNA片段;采用PCR靶向克隆法将扩增产物与含有相同酶切位点载体质粒PET16b-PTD4进行重组,扩增质粒,双酶切鉴定和DNA测序;获得PET16b-PTD4-Cu/ZnSOD(CDs)原核表达载体,导入感受态E.coli BL21(DE3)中,进行扩增培养,收集菌体,将其裂解离心、Ni_2~+亲和层析、收集目的蛋白。融合蛋白孵育人心肌细胞,免疫荧光法检测融合蛋白穿膜能力。结果通过测序证实实验扩增所得的PTD序列与设计的预期序列一致。设计并简并PTD4-Cu/ZnSOD基因长度为567 bp,通过引物进行正反向测序证实该序列与已被登录的GENBANK中Cu/ZnSOD序列相一致,并构建了相应的原核表达质粒。并在E.coli BL21进行大量表达,最终收集的PTD4-Cu/ZnSOD具有良好水溶性。SDS-page分析显示构建的PTD4-Cu/ZnSOD分子量约为20 kDa,与预期的蛋白分子量20.45 kDa相符合。融合蛋白可以穿透心肌细胞胞膜,进入细胞后主要分布在胞质和胞核内并具有天然活性。结论成功地构建了PET16bPTD4-Cu/ZnSOD原核表达质粒,获得了可穿透心肌细胞膜的PTD4-Cu/ZnSOD融合蛋白,为应用Cu/ZnSOD治疗缺血性疾病的研究奠定了基础。(本文来源于《安徽医药》期刊2018年02期）
袁牧,王昌留,段菁菁,胡岳,黄莹[5]（2018）在《青岛文昌鱼铜锌超氧化物歧化酶基因特征与遗传进化分析》一文中研究指出RT-PCR和RACE技术首次克隆了青岛文昌鱼超氧化物歧化酶基因的全长cDNA序列1 285 bp,该基因开放阅读框全长468 bp,编码155个氨基酸,有7个可与铜锌离子结合的位点,预测分子量大约为15 718.32 Da,理论等电点为5.60,编码的蛋白质不存在亚细胞定位的信号肽和跨膜结构域,属于胞内铜锌超氧化物歧化酶。系统进化分析表明文昌鱼的胞内铜锌超氧化物歧化酶位于脊椎动物大分支和无脊椎动物大分支的中间,并且更偏向于脊椎动物。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2018年01期）
车明月,穆贤,李学一,张齐,丛丽娜[6]（2018）在《海参铜锌超氧化物歧化酶原核表达载体的构建、表达及活性鉴定》一文中研究指出采用原核宿主大肠杆菌BL21(DE3)成功表达了具有活性的仿刺参铜锌超氧化物歧化酶(Apostichopus japonicus Cu/Zn-superoxide dismutase,Aj-SOD1)蛋白。利用Trizol法从海参肠组织中提取总RNA,通过反转录PCR扩增获得Aj-SOD1基因的编码序列(GenBank:JX097096.1,459bp),构建克隆载体pMD18-Aj-SOD1;在目的基因两端引入(XhoⅠ/NdeⅠ)酶切位点,构建克隆载体pMD18-AjSOD1(XhoⅠ/NdeⅠ)。将此载体与表达质粒pET30a(+)分别双酶切后连接,构建重组表达载体pET30a-Aj-SOD1。转化至大肠杆菌BL21(DE3),Kan+抗性筛选阳性转化子,获得基因工程菌BL21(DE3)-pET30a-Aj-SOD1。SDS-PAGE和邻苯叁酚自氧化法检测发现,经0.1 mmol/L IPTG诱导8h后,成功获得具有抗氧化活性的Aj-SOD1蛋白。(本文来源于《大连工业大学学报》期刊2018年01期）
朱海生,刘建汀,陈敏氡,李永平,王彬[7]（2017）在《丝瓜铜锌超氧化物歧化酶Cu/Zn-SOD基因家族的克隆与表达分析》一文中研究指出【目的】克隆丝瓜铜/锌超氧化物歧化酶Cu/Zn-SOD基因家族,并分析其序列特征、表达情况及其在丝瓜褐变中的作用,为进一步揭示丝瓜褐变的发生机理提供科学依据,为丝瓜品种遗传改良奠定基础。【方法】通过转录组测序和RT-PCR方法获得丝瓜Cu/Zn-SOD基因家族的c DNA序列,采用生物信息学方法分析氨基酸序列,利用荧光定量PCR技术研究Cu/Zn-SOD基因家族在不同组织及褐变条件下的表达情况。采用氮蓝四唑(NBT)光还原法测定总超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用福林-酚比色测定总酚含量。【结果】获得了3个丝瓜Cu/Zn-SOD基因家族c DNA序列,依次命名为Lc Cu/Zn-SOD1(Gen Bank登录号:KP178922)、Lc Cu/Zn-SOD2(Gen Bank登录号:KX092445)和Lc Cu/Zn-SOD3(Gen Bank登录号:KX092446)。Lc Cu/Zn-SOD1全长758 bp,包含一个456 bp的开放读码框(ORF),编码152个氨基酸;Lc Cu/Zn-SOD2全长799 bp,ORF为471 bp,编码157个氨基酸;Lc Cu/Zn-SOD3全长1 011 bp,ORF为663 bp,编码221个氨基酸;编码的蛋白与甜瓜、南瓜、黄瓜同源蛋白的相似性均在90%以上。生物信息学分析表明3个基因编码的酶蛋白均无信号肽,无跨膜结构域,为亲水性稳定蛋白,Wolf Psort预测其亚细胞定位于细胞质。Cu/Zn-SOD基因家族在根中的表达量最高,在花中表达量最低。在丝瓜采后储藏期间,Lc Cu/Zn-SOD1和Lc Cu/Zn-SOD3在丝瓜储藏初期表达量较采后当时(0 d)上调,后期表达量受到抑制;在丝瓜鲜切条件下,3个基因表达量在鲜切后较采后当时(0 h)总体呈下降趋势。相关性分析显示,在采后储藏和鲜切条件下,Lc Cu/Zn-SOD1表达量均与SOD酶活性呈极显着性正相关,Lc Cu/Zn-SOD3表达量均与SOD酶活性呈显着性正相关,SOD酶活性在鲜切条件下与总酚含量呈显着负相关,Lc Cu/Zn-SOD1和Lc Cu/Zn-SOD3在调控SOD酶活性方面起作重要作用,Lc Cu/Zn-SOD1和Lc Cu/Zn-SOD3的表达影响了SOD酶活性,并影响了丝瓜褐变进程。【结论】从丝瓜果肉中获得Cu/Zn-SOD基因家族的3个,其中Lc Cu/Zn-SOD1和Lc Cu/Zn-SOD3在普通丝瓜果肉褐变过程中可能发挥着重要作用。(本文来源于《中国农业科学》期刊2017年17期）
赵兵,庄小禹,刘舒,郑重,刘志强[8]（2017）在《离子淌度质谱结合荧光光谱法研究5-氟尿苷与铜锌超氧化物歧化酶的相互作用》一文中研究指出分别利用离子淌度质谱和荧光光谱方法研究了5-氟尿苷(5-Furd)与铜锌超氧化物歧化酶(SOD1)的相互作用.离子淌度质谱研究结果表明,5-Furd能够稳定SOD1构型,减缓其碰撞诱导去折迭;外源荧光光谱方法进一步证明5-Furd可以抑制SOD1的聚集.利用荧光光谱研究了不同温度下5-Furd与SOD1的相互作用,阐明了二者的作用机制、结合常数和结合位点数,并根据热力学函数推断二者的作用力类型为典型的疏水作用.(本文来源于《高等学校化学学报》期刊2017年08期）
郭朝霞,高志凌,姚彦红,李春明,尤涛[9]（2017）在《不同剂量氯胺酮对体外循环缺血再灌注心肌铜锌超氧化物歧化酶基因表达的影响》一文中研究指出目的探讨体外循环(CPB)手术中氯胺酮(KET)在缺血再灌注心肌对铜锌超氧化物歧化酶(CuZn SOD)基因表达的影响及其作用机制。方法选取2006年3-9月在甘肃省人民医院心外科行先天性心脏病修补手术的30例患者为研究对象,随机分为A、B、C组(各10例),B组和C组分别静脉滴注1 mg/kg和0.5 mg/kg的KET,A组给予同等量0.9%氯化钠溶液干预。于主动脉阻断前、主动脉阻断后1h、主动脉开放后30 min从右心耳分别提取心肌组织,提取的心肌组织总核糖核酸(RNA)通过荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),以β肌动蛋白(β-actin)为内参对照Cu-Zn SOD mRNA的表达水平进行检测。结果 3组在主动脉阻断前心肌组织CuZn SOD mRNA比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组在主动脉阻断后1 h及主动脉开放后30 min心肌组织CuZn SOD mRNA低于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05);B组和C组在主动脉阻断后1 h及主动脉开放后30min心肌组织Cu-Zn SOD mRNA比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 KET可提高缺血再灌注心肌组织中Cu-Zn SOD mRNA含量,抑制大量氧自由基生成,从而发挥抗氧化、抗炎作用,进而保护心肌。(本文来源于《中国全科医学》期刊2017年S2期）
林文洋[10]（2017）在《深海热液区盲虾Rimicaris Exoculata转录组分析及其铜锌超氧化物歧化酶的初步研究》一文中研究指出深海热液口生态系统是一个非常独特的,有别于浅海和陆地的生态系统。阳光无法到达,完全的黑暗地带,生物无法通过光合作用方式来进行初级生产。除此之外,热液区域还存在极高的海水压力,高酸,高还原性,溶解了大量重金属(铝,铜,钴,铁,铅,镁,锌),硫等有毒化学物质,缺乏食物来源,这些因素共同构成了热液口区恶劣的环境条件。但深海热液区却有着繁荣的生物群落,这样极端的条件下,生物们普遍进化出了一套适应系统。所以深海热液口是许多潜在优质功能基因的宝库。盲虾Rimicaris exoculata,主要生活在大西洋热液口的“黑烟囱”附近,是其生存领域的优势种。据报道,盲虾的生物量最高可以达到3000只/m~2,其表现出了对热液口的高度适应性是热液区生物的理想研究对象。从大西洋中脊的热液口(15°9′S,13°21′W),3059米的深海,我们采集了盲虾进行了分析,以了解盲虾的代谢特征、功能基因信息以及其对热液口的适应机制。首先,我们提取RNA,利用第二代测序技术,illumina 2000平台进行全面的测序,得到了盲虾全面的转录组信息。总计产出4887093420 nt数据,通过拼接共组装成35772个Unigenes,平均长度582 nt,总长20829573 nt,预测编码蛋白框(CDS)共20450个。通过Unigene功能注释,注释到NR,NT,Swiss-Prot,KEGG,COG,GO库的Unigene分别是15660个,6230个,13575个,11783个,6321个,8142个,所有注释上的Unigene 17258个Unigenes。通过转录组分析,我们对盲虾的分子特征有了一个总的了解。在基本代谢方面,盲虾在缬氨酸,亮氨酸,异亮氨酸这条必需氨基酸通路上注释完整,其暗示着盲虾可能拥有能从头合成这些必需氨基酸的能力。其次,在环境适应性硫代谢途径中,盲虾转录组中有许多硫解毒相关基因被注释出来。通过分析这些酶,有能催化硫化氢转化为毒性较低的硫单质,也能将硫化氢转化为有机硫。除此之外,我们还发现了盲虾体内有可能存在SOX系统。最后我们分析了盲虾的免疫相关系统,选取了Toll-like,JAK-STAT,IMD通路这几个具有代表性的途径进行分析,发现盲虾的Toll-like,JAK-STAT通路完整,而IMD通路转录水平的表达有所残缺。生命体在氧化还原反应中,会产生活性氧,活性氧如果不能及时被清除会使脂膜过氧化,碱基突变,DNA链断裂,蛋白质损伤。超氧化物歧化酶SOD,是生物体内重要的抗氧化酶,可以消除氧自由基对机体的损伤。其广泛存在于动物,植物,微生物中,在医药,食品,保健品,农业,化妆品等领域都有很大的应用价值。盲虾所处的环境,氧胁迫压力大,所以其可能蕴含着优质的SOD酶。经过对转录组信息进行挖掘,我们选取一个SOD进行进一步研究。本研究中我们以大肠杆菌作为异源表达宿主,克隆表达盲虾的一个SOD基因。重组蛋白以包涵体的形式存在,通过纯化,复性获得了一个具有SOD活性的蛋白,命名为RESOD。对RESOD进行活性研究发现,其是一个低温耐碱酶,最适反应温度和pH分别是10℃和10,在不同pH下处理一个小时后,pH等于10对其影响最小。在4℃下,酶活较为稳定,放置144h,还具有原酶活的60%。通过进一步分析,钴,镁,锰,钡,钙对RESOD都有抑制作用。经初步研究,RESOD是一种低温、耐碱性条件的Cu-Zn SOD,有着良好的经济价值和应用潜力。(本文来源于《国家海洋局第叁海洋研究所》期刊2017-07-01）
铜锌超氧化物歧化酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:在大肠杆菌中表达并纯化人铜锌超氧化物歧化酶(HuSOD1)。方法:合成HuSOD1编码基因,PCR扩增后连入pMAL-p5x质粒构建融合表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态,IPTG诱导表达,NBT法测定HuSOD1酶活,利用麦芽糖结合蛋白亲和层析柱纯化MBP-HuSOD1融合蛋白,经因子Ⅹa酶切及分子筛柱层析纯化HuSOD1蛋白。结果:构建了pMAL-p5x-HuSOD1表达载体,在大肠杆菌中实现了高表达,目的蛋白占全菌蛋白的30%,其中可溶性表达占63%,具有超氧化物歧化酶活性;通过亲和层析纯化得到纯度大于95%的融合蛋白MBP-HuSOD1,经因子Ⅹa酶切后纯化得到纯度约90%的HuSOD1蛋白。结论:在大肠杆菌中表达并纯化获得有活性的MBP-HuSOD1,经进一步酶切、纯化后得到HuSOD1。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
铜锌超氧化物歧化酶论文参考文献
[1].孜拉吉古丽·西克然木,马纪,库尔班·吐松,刘小宁.小胸鳖甲胞外铜锌超氧化物歧化酶重组蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J].四川动物.2019
[2].刘晓阳,刘凌志,李彤,汪建华,张惟材.人铜锌超氧化物歧化酶在大肠杆菌中的融合表达与纯化[J].生物技术通讯.2018
[3].刘云财,苏航,王沛城,徐雅岚,魏天铖.桑螟胞外铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与融合表达及重组蛋白酶活性检测[J].蚕业科学.2018
[4].王宇,刘菊英,王贤裕,柯昌斌,李瑞明.蛋白转导结构域4-铜/锌-超氧化物歧化酶融合蛋白的制备及其穿细胞膜的功能研究[J].安徽医药.2018
[5].袁牧,王昌留,段菁菁,胡岳,黄莹.青岛文昌鱼铜锌超氧化物歧化酶基因特征与遗传进化分析[J].基因组学与应用生物学.2018
[6].车明月,穆贤,李学一,张齐,丛丽娜.海参铜锌超氧化物歧化酶原核表达载体的构建、表达及活性鉴定[J].大连工业大学学报.2018
[7].朱海生,刘建汀,陈敏氡,李永平,王彬.丝瓜铜锌超氧化物歧化酶Cu/Zn-SOD基因家族的克隆与表达分析[J].中国农业科学.2017
[8].赵兵,庄小禹,刘舒,郑重,刘志强.离子淌度质谱结合荧光光谱法研究5-氟尿苷与铜锌超氧化物歧化酶的相互作用[J].高等学校化学学报.2017
[9].郭朝霞,高志凌,姚彦红,李春明,尤涛.不同剂量氯胺酮对体外循环缺血再灌注心肌铜锌超氧化物歧化酶基因表达的影响[J].中国全科医学.2017
[10].林文洋.深海热液区盲虾RimicarisExoculata转录组分析及其铜锌超氧化物歧化酶的初步研究[D].国家海洋局第叁海洋研究所.2017
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