一个来自节丛孢菌的多糖单加氧酶的表达与表征

一个来自节丛孢菌的多糖单加氧酶的表达与表征

论文摘要

从一株具有降解纤维素能力的Arthrobotrys sp.CX1菌株中成功克隆得到编码LPMO蛋白的基因,命名为LPMO10331。连接到pPICZαA表达载体上并转化至Pichia pastoris X-33菌株中进行诱导表达,获得一个新的多糖单加氧酶,命名为LPMO10331。应用SEM和XRD等方法对该重组酶进行酶活表征,结果表明,在1 mmol/L维生素C条件下,滤纸纤维素结晶度下降了8%,链内和链间的氢键发生断裂,并且使滤纸表面纤维素多糖链发生氧化还原反应产生了许多断裂端口。

论文目录

  • 0 引 言
  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与仪器
  •     1.1.1 材 料
  •     1.1.2 仪 器
  •   1.2 方 法
  •     1.2.1 LPMO10331蛋白毕赤酵母X-33重组菌株的构建与表达
  •       1.2.1.1 重组质粒pPICZαA-LPMO10331的构建
  •       1.2.1.2 pPICZαA-LPMO10331/X-33毕赤酵母重组菌株的构建
  •       1.2.1.3 目的蛋白LPMO10331的表达
  •     1.2.2 LPMO10331酶活的表征
  •       1.2.2.1 酶反应体系及条件
  •       1.2.2.2 酶活检测
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 LPMO10331蛋白在毕赤酵母表达体系中的构建与表达
  •     2.1.1 LPMO10331氨基酸序列比对
  •     2.1.2 LPMO10331基因片段的扩增结果
  •     2.1.3 pPICZαA-LPMO10331重组质粒的构建及鉴定
  •     2.1.4 pPICZαA-LPMO10331/X-33重组菌的构建及蛋白表达
  •   2.2 重组LPMO10331酶的酶活鉴定
  •     2.2.1 SEM观察LPMO10331处理滤纸后的形态变化
  •     2.2.2 XRD检测经LPOM10331酶处理后滤纸结晶度的变化
  • 3 结 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 韩梦丽,由林鹭,李宪臻,李蓉

    关键词: 多糖单加氧酶,节丛孢菌,纤维素酶解

    来源: 大连工业大学学报 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 大连工业大学生物工程学院

    分类号: Q936

    DOI: 10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2019.0404

    页码: 248-252

    总页数: 5

    文件大小: 3067K

    下载量: 69

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