IGF-1对兔脂肪干细胞增殖和成骨分化的影响

IGF-1对兔脂肪干细胞增殖和成骨分化的影响

论文摘要

目的探讨胰岛素样生长因子(IGF-1)对兔脂肪干细胞(ADSCs)增殖和成骨分化的影响。方法无菌条件下从兔颈后部取出脂肪组织,Ⅰ型胶原酶消化法将ADSCs从脂肪组织中分离,观察细胞生长。采用免疫荧光法检测ADSCs表面特异性标志物CD90。P3代ADSCs在成脂和成骨诱导培养液的诱导下向成脂和成骨方向分化,油红O、茜素红染色定性鉴定。在成骨诱导培养基中加入IGF-1,设置培养基IGF-1浓度为0、5、10、20 ng/ml四组,观察不同浓度IGF-1对ADSCs增殖活性、碱性磷酸酶(ALP)和钙离子含量的影响。CCK-8法检测各组ADSCs的增殖活性,茜素红染色定性检测各组ADSCs的成骨分化能力;通过测定ALP和钙离子含量定量检测各组ADSCs成骨分化能力。结果原代及传代的兔ADSCs均呈长梭形或成纤维细胞样外观,生长分化活跃。免疫荧光检测ADSCs高度表达表面特异蛋白CD90,培养的细胞具有成骨分化和成脂分化的能力。IGF-1可以促进ADSCs增殖活性和提高ADSCs的ALP、钙离子含量。IGF-1浓度越高,ADSCs增殖活性和ALP、钙离子含量越高。结论 IGF-1可以促进兔ADSCs的增殖与成骨分化。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验动物
  •   1.2 主要试剂与仪器
  •   1.3 兔ADSCs的分离与培养
  •   1.4 ADSCs表面抗体的检测
  •   1.5 兔ADSCs向脂肪细胞诱导分化
  •   1.6 兔ADSCs向成骨细胞诱导分化
  •   1.7 CCK-8法检测IGF-1对ADSCs增殖活性的影响
  •   1.8 茜素红染色检测钙结节及定性分析
  •   1.9 ALP与钙离子含量的检测及定量分析
  •   1.10 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 兔ADSCs的形态
  •   2.2 ADSCs免疫荧光鉴定结果
  •   2.3 ADSCs成脂诱导分化结果
  •   2.4 ADSCs成骨诱导分化结果
  •   2.5 ADSCs的增殖活性曲线
  •   2.6 钙离子茜素红染色的检测结果
  •   2.7 ALP和钙离子的定量检测
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 朱思斌,张雪,江飞,许易诚,尹宗生

    关键词: 胰岛素样生长因子,脂肪干细胞,成骨分化

    来源: 安徽医科大学学报 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 外科学

    单位: 安徽医科大学第一附属医院骨科,安徽医科大学第一附属医院普外科

    基金: 国家自然科学基金(编号:81171173)

    分类号: R68

    DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.12.015

    页码: 1913-1917

    总页数: 5

    文件大小: 1946K

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