论文摘要
盐地碱蓬(Suaeda salsa L.)是一种具有高耐盐性的真盐生植物,在潮间带和内陆生境中长势良好,但其生长环境中特别是潮间带生境土壤中的NO3-含量非常低,但目前尚不清楚这两种生境的盐地碱蓬是如何适应低氮环境的。本文探究了两种生境盐地碱蓬对低氮环境适应的生理及分子机制。结果如下:1.N饥饿对盐地碱蓬NO3-由源到库再利用的影响将两种生境盐地碱蓬在200 mM NaCl条件下用1 mM NO3--N预培养。然后将幼苗用1 mM NO3--N和无N溶液(N饥饿)一起培养14天后,测定与NO3-再利用相关基因的表达、NO3-和叶绿素含量、净光合速率以及生物量。结果表明,N饥饿处理后,与内陆生境相比,潮间带生境盐地碱蓬SsNRT1.7在老叶和成熟叶中的表达显著上调,但在幼叶中并非如此。并且潮间带生境NO3-和叶绿素含量、幼叶净光合速率和地上部干重的下降幅度均低于内陆生境。因此,与N饥饿处理后的内陆生境相比,SsNRT1.7可能在潮间带生境的老叶或成熟叶的NO3-再活化过程中发挥了更重要的作用。因此,在低氮环境中,相比于内陆生境,潮间带生境幼叶中更多的NO3-能够更好地维持光合作用。2.盐地碱蓬NO3-再利用相关基因SsNRT1.7的全长克隆根据盐地碱蓬转录组测序结果得到的NO3-再利用相关基因NRT1.7信息,克隆得到中间序列(暂命名为SsNRT1.7),将该序列进行blast比对分析,结果显示该序列与甜菜的NRT1/PTR FAMILY2.12蛋白的相似度为81%。以该序列为基础通过3’RACE和5’RACE技术扩增得到SsNRT1.7基因的全长2375 bp,CDS区1851 bp。编码区与拟南芥AtNRT1.7编码区的同源性为55.83%。3.盐地碱蓬SsNRT1.7的生物信息学分析及亚细胞定位SsNRT1.7编码617个氨基酸。对该蛋白进行理化性质分析,该蛋白为疏水稳定蛋白;将其氨基酸序列进行SMART分析,存在PTR2保守结构域;用TMHMM软件对蛋白的跨膜结构进行分析,该蛋白存在12个跨膜结构域;利用MEGA软件对该基因的蛋白序列进行系统进化分析,发现该蛋白与甜菜、菠菜、藜麦的亲缘关系最近。将SsNRT1.7基因连接到表达载体pCAMBIA1300-35S-sGFP上,经农杆菌转化测序成功后,对烟草进行瞬时转化,用双光子激光扫描共聚焦显微镜观察烟草表皮细胞内SsNRT1.7和GFP的融合表达情况。结果显示,转空载体pCAMBIA1300-35S-sGFP的细胞内布满了绿色荧光,而转SsNRT1.7的烟草表皮细胞只有细胞膜有绿色荧光,表明SsNRT1.7定位于细胞膜。4.拟南芥AtNRT1.7突变体、SsNRT1.7转基因纯合株系的筛选我们选取SALK022429拟南芥突变体株系,利用双引物法进行鉴定,获得了SALK022429纯合植株。将SsNRT1.7基因连接到表达载体pCAMBIA1300-35S-sGFP上,经农杆菌转化测序成功后,对纯合突变体植株和WT植株进行花序侵染,获得过表达和回补植株,利用潮霉素抗性筛选出阳性植株,并进行DNA水平的验证,最终获得纯合过表达和回补株系,并根据荧光定量PCR结果筛选出表达量较高的株系。
论文目录
文章来源
类型: 硕士论文
作者: 马艳春
导师: 宋杰
关键词: 真盐生植物,盐地碱蓬,拟南芥,再利用
来源: 山东师范大学
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学,生物学
单位: 山东师范大学
分类号: Q943.2
总页数: 76
文件大小: 3248K
下载量: 113
相关论文文献
- [1].模拟干旱和盐碱胁迫对碱蓬、盐地碱蓬种子萌发的影响[J]. 中国生态农业学报 2018(07)
- [2].身兼多职的盐地碱蓬[J]. 少儿科技 2016(Z1)
- [3].新疆盐生植物——盐地碱蓬简介[J]. 新疆农垦科技 2019(02)
- [4].盐地碱蓬生长对滨海重盐碱地的改土效应[J]. 中国生态农业学报(中英文) 2019(10)
- [5].盐地碱蓬在高盐碱土环境中的生态学意义[J]. 干旱区研究 2015(06)
- [6].沿海滩涂“景观型”盐地碱蓬栽培技术规程[J]. 现代园艺 2017(06)
- [7].不同盐度环境下盐地碱蓬幼苗光合生理生态特征[J]. 干旱区研究 2014(05)
- [8].江苏盐地碱蓬种植技术规范[J]. 上海农业科技 2019(01)
- [9].钠盐和氯化物对真盐生植物盐地碱蓬营养生长的影响[J]. 植物生理学报 2018(03)
- [10].滨海湿地盐地碱蓬对铯污染的响应及富集规律[J]. 农业环境科学学报 2019(03)
- [11].盐地碱蓬AGO蛋白基因家族的分离及表达分析[J]. 海洋科学进展 2019(02)
- [12].ICP-MS测定盐地碱蓬籽油中必需微量元素含量[J]. 中国油脂 2016(10)
- [13].盐地碱蓬中叶绿素的提取研究[J]. 当代畜牧 2017(36)
- [14].不同盐度施氮水平下盐地碱蓬幼苗生长及光合色素含量分析[J]. 干旱区研究 2013(05)
- [15].盐地碱蓬籽油的甘三酯组成及理化特性分析[J]. 粮食与油脂 2018(04)
- [16].不同生境下两种表型盐地碱蓬叶片POD比较研究[J]. 山东师范大学学报(自然科学版) 2008(04)
- [17].盐地碱蓬愈伤组织的诱导及其脯氨酸含量的变化[J]. 中国草地学报 2008(06)
- [18].盐地碱蓬绿化栽培品系的选育与配套技术[J]. 湖北农业科学 2014(07)
- [19].野生盐地碱蓬中18种氨基酸的测定[J]. 医学动物防制 2008(02)
- [20].野生盐地碱蓬汁的营养成分分析[J]. 医学动物防制 2008(08)
- [21].基于高通量测序技术的盐地碱蓬根际细菌群落多样性分析[J]. 浙江理工大学学报(自然科学版) 2020(05)
- [22].盐地碱蓬内生菌的分离及功能酶的检测[J]. 唐山师范学院学报 2018(06)
- [23].施加不同量外源氮和互为伴生种下碱蓬和盐地碱蓬生物量变化的野外模拟实验[J]. 湿地科学 2019(01)
- [24].盐地碱蓬的染色体核型分析[J]. 山东科学 2013(02)
- [25].盐地碱蓬有效成分提取方法及工艺研究进展[J]. 食品工业科技 2018(04)
- [26].盐地碱蓬愈伤组织原生质体的分离纯化[J]. 山东农业科学 2012(12)
- [27].盐地碱蓬食用价值的研究[J]. 安徽农业科学 2010(26)
- [28].盐地碱蓬红色素的提取工艺[J]. 大连工业大学学报 2013(05)
- [29].Pb~(2+)、Zn~(2+)、Cd~(2+)胁迫对盐地碱蓬种子萌发的影响[J]. 浙江农业科学 2018(12)
- [30].不同浓度NaCl处理对盐地碱蓬萌发及生长的影响[J]. 西北民族大学学报(自然科学版) 2017(04)