家蚕核型多角体病毒表面展示猪流行性腹泻病毒S1蛋白及其黏膜免疫原性研究

家蚕核型多角体病毒表面展示猪流行性腹泻病毒S1蛋白及其黏膜免疫原性研究

论文摘要

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)可以通过呼吸道感染在猪群中传播,提示呼吸道粘膜也许可以作为疫苗免疫接种的位点。PEDV通过表面的纤突蛋白S识别受体并侵入宿主细胞,该蛋白质S1区(1~735 aa)是PEDV主要的中和位点以及受体结合域,参与病毒吸附入侵宿主细胞。利用家蚕核型多角体病毒在BmN细胞中表达融合蛋白S1-eGFP并展示于病毒表面,Western blot鉴定融合蛋白分子质量约为150 kD。以重组杆状病毒为免疫原雾化免疫BALB/c小鼠,结果表明免疫16 d后小鼠血清中S1特异性IgG抗体效价可达1∶3 200,血清和肺气管润洗液中都能检测到高水平的S1特异性sIgA,说明引起了较强的黏膜免疫反应;脾淋巴细胞增殖结果进一步表明重组杆状病毒雾化免疫可以有效地诱导小鼠产生细胞免疫。研究结果初步表明,表面展示S1的重组杆状病毒可以作为PEDV黏膜免疫候选疫苗,具有进一步开发研究的价值。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料和主要试剂
  •   1.2 重组家蚕杆状病毒的构建及滴度测定
  •   1.3 重组S1蛋白表达的Western blot分析
  •   1.4 雾化免疫及血清中抗体效价的检测
  •   1.5 血清和肺气管润洗液中sIgA的间接ELISA检测
  •   1.6 雾化免疫后小鼠脾淋巴细胞增殖结果分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 重组BmBacmid的鉴定
  •   2.2 重组S1蛋白在BmN细胞中的表达与鉴定
  •   2.3 雾化免疫小鼠血清中的IgG效价检测
  •   2.4 雾化免疫后小鼠血清及肺气管润洗液中的sIgA检测
  •   2.5 雾化免疫后小鼠脾淋巴细胞的增殖检测
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘轶轩,严婷婷,徐萌,卢天翼,舒建洪,陈健

    关键词: 家蚕核型多角体病毒,细胞,猪流行性腹泻病毒,蛋白,黏膜免疫

    来源: 蚕业科学 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 浙江理工大学生命科学与医药学院,浙江省家蚕生物反应器和生物医学重点实验室

    基金: 浙江省重点研发计划项目(No.2019C02043)

    分类号: S852.651

    DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2019.02.009

    页码: 218-224

    总页数: 7

    文件大小: 2943K

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