黄曲霉产β-1,4-木聚糖酶发酵条件的优化及其酶学特性

黄曲霉产β-1,4-木聚糖酶发酵条件的优化及其酶学特性

论文摘要

研究发现一株高产β-1,4-木聚糖酶的黄曲霉,拟优化其产酶条件并分析该酶的酶学特性。采用单因素法优化其摇瓶发酵条件,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结合酶谱法判定酶的特性以及薄层色谱分析法(TLC)判定酶的水解特异性。结果表明,产酶最佳培养基为:麸皮3.5%、磷酸氢二铵3.0%、吐温-60 1.0%、NaCl 0.5%、MgSO4·7H2O 0.05%和KH2PO4 0.075%;黄曲霉在35℃下培养5 d达到最高酶活力115.08 U/mL,为未优化时的9.4倍。该菌能分泌两种β-1,4-木聚糖酶,分子量约为20.1和31.0 kDa,均不同于已有报道。粗酶的最适pH和最适温度分别为MOPS 7.5和55℃,在pH5.5~9.0及30~50℃范围内能保持酶活力的稳定。该酶不仅能水解榉木木聚糖产生低聚木糖,还能微弱降解大麦葡聚糖,有助于它在木质纤维素降解领域中的应用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与仪器
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 发酵产β-1, 4-木聚糖酶
  •     1.2.2 发酵产β-1, 4-木聚糖酶条件的优化
  •     1.2.3 β-1, 4-木聚糖酶酶活力及蛋白含量的测定
  •     1.2.4 黄曲霉胞外β-1, 4-木聚糖酶的盐析分级
  •     1.2.5 SDS-PAGE及β-1, 4-木聚糖酶酶谱分析
  •     1.2.6 黄曲霉β-1, 4-木聚糖酶的酶学特性研究
  •       1.2.6.1 最适pH测定
  •       1.2.6.2 pH稳定性的测定
  •       1.2.6.3 最适温度测定
  •       1.2.6.4 温度稳定性的测定
  •       1.2.6.5 底物特异性测定
  •       1.2.6.6 水解榉木木聚糖的特异性研究
  •   1.3 数据处理
  • 2 结果与分析
  •   2.1 碳源对黄曲霉发酵产胞外β-1, 4-木聚糖酶的影响
  •   2.2 氮源对黄曲霉发酵产胞外β-1, 4-木聚糖酶的影响
  •   2.3 表面活性剂对黄曲霉发酵产胞外β-1, 4-木聚糖酶的影响
  •   2.4 发酵温度对黄曲霉发酵产胞外β-1, 4-木聚糖酶的影响
  •   2.5 发酵时间对黄曲霉发酵产胞外β-1, 4-木聚糖酶的影响
  •   2.6 黄曲霉胞外分泌β-1, 4-木聚糖酶的特性分析
  •   2.7 黄曲霉β-1, 4-木聚糖酶的酶学特性研究
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈瑶瑶,陈洲,刘璐,刘杨柳,李思霆,贾英民

    关键词: 黄曲霉,木聚糖酶,发酵条件,酶学特性,水解特异性

    来源: 食品工业科技 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 一般化学工业

    单位: 北京工商大学食品学院

    基金: 国家自然科学基金项目(31771951&31801510),北京市博士后工作经费资助项目(2018-ZZ-009),中国博士后科学基金资助项目(2018M631288)

    分类号: TQ925

    DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.07.023

    页码: 131-137

    总页数: 7

    文件大小: 1329K

    下载量: 231

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