引物延伸预扩增论文_韦红英,龙桂芳,刘壮,林伟雄

导读:本文包含了引物延伸预扩增论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:引物,地中海,产前诊断,胚胎,分子病,胎儿,基因。

引物延伸预扩增论文文献综述

韦红英,龙桂芳,刘壮,林伟雄^[1]（2007）在《引物延伸预扩增在β-地中海贫血产前基因诊断中的应用研究》一文中研究指出目的探讨孕妇外周血中单个胎儿有核红细胞(NRBC)经引物延伸预扩增(PEP)后在β-地中海贫血产前基因诊断中应用的可行性。方法以2004年7月至2005年6月在广西医科大学第一附属医院行产前诊断,夫妇均为轻型β-地中海贫血,孕龄9～34周的28例孕妇为研究对象。显微操作获取母血中NRBC,PEP对单个NRBC进行全基因组扩增,短串联重复序列(STR)鉴定所取细胞的来源。证实为胎儿细胞的PEP产物作为模板进行β-珠蛋白基因扩增,反向点杂交确定胎儿β-珠蛋白基因型。结果每例发现NRBC4～13个,约43.6%的NRBC来源于胎儿。单个NRBC经PEP后STR及β-珠蛋白基因扩增成功率分别为100.0%和90.8%。经反向点杂交可鉴定胎儿β-珠蛋白基因点突变类型,与传统的产前诊断结果相比较,符合率为85.7%,误诊率14.3%。结论母血中单个胎儿NRBC经PEP后可以进行产前基因诊断,不仅可以应用于β-地中海贫血,也可应用于其它遗传病,是一条可供尝试的无创性产前诊断途径。(本文来源于《中国实用妇科与产科杂志》期刊2007年11期）

韦红英,龙桂芳,刘壮,林伟雄,李树全^[2]（2006）在《引物延伸预扩增技术在β地中海贫血无创性产前基因诊断的应用研究》一文中研究指出目的:探讨孕妇外周血中单个胎儿有核红细胞(Nucleated red blood cell,NRBC)经引物延伸预扩增 (Primer extension preamplification,PEP)后在β地中海贫血无创性产前基因诊断中应用的可行性,试图建立一条新的β地中海贫血无创性产前基因诊断途径。方法:1．新鲜孕妇外周血用淋巴细胞分离液分离到单个核细胞,涂片,干燥,1％联苯胺染色,苏木素复染。400倍光镜下观察识别到NRBC,显微操作器将细胞单个获取。2．PEP法对单个NRBC进行全基因组扩增,产物分装为数份保存备检。3．取待检细胞的一份PEP产物进行短串联重复序列(Short tandem repeat,STR)PCR,根据STR基因型来鉴定所取(本文来源于《中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编》期刊2006-11-01）

韦红英,龙桂芳,林伟雄,李树全^[3]（2006）在《引物延伸预扩增后STR分型在鉴定母血中胎儿有核红细胞的应用》一文中研究指出目的探讨一种鉴定母血中胎儿有核红细胞(NRBC)的方法,为无创性产前基因诊断创造必要条件。方法联苯胺染色识别孕妇外周血中 NRBC,经显微操作获取,并以引物延伸预扩增(PEP)对单个 NRBC 进行全基因组扩增后,用短串联重复序列(STR)分析其基因型,与父母基因型比对,确定该细胞的来源。结果 28例轻型β地中海贫血孕妇外周血样本中每例发现 NRBC 4～13个/5ml,经鉴定每例有胎儿 NRBC 2～8个/5ml,约43.6%的 NRBC 来源于胎儿。结论 PEP 后 STR 基因型分析能有效鉴定孕妇外周血中 NRBC 的来源,使应用单个胎儿 NRBC 进行产前基因诊断成为可能。(本文来源于《中华血液学杂志》期刊2006年10期）

焦泽旭,庄广伦,周灿权,梁晓燕,张敏芳^[4]（2003）在《应用引物延伸预扩增方法对地中海贫血进行植入前遗传学诊断的初步研究》一文中研究指出植入前遗传学诊断 (PGD)由于可检测的材料仅 1～ 2个卵裂球细胞 ,很难进行一个基因的多种突变或多位点基因改变的基因分析。引物延伸预扩增 (PEP)是随机扩增单细胞全基因组的有效方法 ,有望解决这个问题。我们在本研究中探讨PEP在地中海贫血 (珠蛋白(本文来源于《中华血液学杂志》期刊2003年10期）

马锦琪,盛毅,赵亚南,纪亚忠^[5]（2003）在《引物延伸预扩增用于胚胎种植前诊断的实验研究》一文中研究指出目的　用引物延伸预扩增 (PEP)方法对种植前胚胎进行单基因病诊断的实验研究。方法　取IVF后剩余胚胎的一个卵裂球用PEP方法 ,扩增SRY、ZP3 、RhCE、RhD和FVIII 5个基因 ,而同一胚胎的另一个卵裂球双重套式PCR扩增SRY和ZP3 基因。结果　PEP分析分别由 6个胚胎获得的 6个卵裂球 ,1- 4号胚胎有 19个基因呈阳性 (19/ 2 0 ) ,1个基因阴性 ,5 ,6号胚胎除SRY均阴性 ,其余基因为阳性 ;而 6个胚胎的卵裂球双重套式PCR扩增SRY和ZP3 基因的结果与同一胚胎PEP的结果相同。结论　采用PEP方法进行种植前胚胎单基因病的诊断是可靠、准确的 ,且可用于无创性产前诊断。(本文来源于《中国优生与遗传杂志》期刊2003年02期）

焦泽旭,庄广伦,周灿权,舒益民,李洁^[6]（2003）在《引物延伸预扩增法应用于β-地中海贫血患者胚胎植入前遗传学诊断——附一例报告》一文中研究指出目的　探讨对 β 地中海贫血进行胚胎植入前遗传学诊断 (PGD)的方法。 方法　两对夫妇双方均分别为密码子 41 42 ( TCTT)及插入序列 (IVS) Ⅱ 65 4(C→T)突变杂合子 ,在本中心进行超排卵和体外受精 胚胎移植治疗 ,胚胎活检后应用全基因组扩增技术及反向点杂交进行胚胎PGD ,根据诊断结果选择健康的胚胎移植入子宫。结果　 2例患者共获卵 3 5个 ,受精率为 87% ,共活检胚胎16个 ,获卵裂球 2 5个 ,单卵裂球总扩增效率为 84% ,等位基因脱扣率为 15 %。 2例患者共移植 5个胚胎 ,1例获得妊娠 ,已分娩健康双胎。结论　应用引物延伸预扩增技术可对 β 地中海贫血进行PGD ,达到优生的目的(本文来源于《中华妇产科杂志》期刊2003年03期）

马锦琪,纪亚忠,盛毅,赵亚南^[7]（2001）在《单细胞引物延伸预扩增分析多个基因》一文中研究指出目的　建立一种单细胞 (individual cell)水平引物延伸预扩增 (primer extensionpreamplification,PEP)方法 ,利用单个细胞同时分析多个基因。方法　采用 10 bp的随机引物先对单细胞的基因组预扩增 ,取其产物 5μl分别对 SRY、ZP3、Rh CE、Rh D、F 5个基因进行套式 PCR扩增。结果　单细胞 PEP后的产物能同时扩增 5个基因 ;对 4种已知基因型的白细胞进行诊断 ,正确率为 95 .6 %。结论PEP技术可以在单细胞水平分析 5个基因 ,可用于胚胎种植前诊断及无创性产前诊断(本文来源于《中华医学遗传学杂志》期刊2001年05期）

贺桂芳,马旭,陈汉平^[8]（2001）在《应用引物延伸预扩增反应技术检测孕妇血浆中的胎儿DNA》一文中研究指出目的 :建立一种检测孕妇血浆中胎儿DNA的新方法。方法 :对 6 5例 5～ 41孕周的孕妇血浆中胎儿DNA采用引物延伸预扩增 (PEP)后行特异性位点聚合酶链反应 (PCR)扩增 ,并用探针微孔板杂交法检测PCR产物。扩增的基因为Y染色体短臂SRY基因 ,扩增片段的大小分别为 35 1bp和 2 5 4bp。 结果 :46例妊娠男性胎儿的孕妇中 41例血浆中出现SRY基因扩增带 ,检出率 89.13 % ;19例妊娠女性胎儿的孕妇中 3例 (15 .79% )为假阳性。本研究孕早、中、晚期的性别符合率分别为 10 0 %、90 .91%、75 % ,总符合率 86 .15 %。结论 :利用PEP法能解决孕妇外周血中胎儿细胞数量太少达不到常规扩增条件所要求的最低模板量的问题 ,同时配合探针微孔板杂交法能使诊断结果更准确。(本文来源于《中日友好医院学报》期刊2001年02期）

赵庆国,张郁,李丽君,焦保权,朱爱萍^[9]（2000）在《应用引物延伸预扩增提高微量DNA拷贝数》一文中研究指出采用引物延伸预扩增方法 ,可普遍提高微量模板DNA的拷贝数 ,便于进行基因分析时克服标本量少、来源困难的制约。采用常规扩增、检测 2 4 8bp的DYZ1片段体系为观察对象 ,其最小模板量需 1.5ng/2 0 μl体系。以 15个碱基随机寡核苷酸为引物 ,对最小模板量进行预扩增 ,再以其产物 1/10为模板 ,特异扩增DYZ1片段。进行相对定量分析 ,判断原模板DNA拷贝数增加的程度。结果 1.5ng男性DNA经随机扩增后 ,此DYZ1片段拷贝数增加了 10倍以上 ,大大地提高了特异DNA片段扩增的模板量。表明经随机引物延伸预扩增后 ,微量标本DNA片段拷贝数获得普遍提高 ,增加了微量DNA扩增的敏感度(本文来源于《生物技术通讯》期刊2000年01期）

引物延伸预扩增论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

目的:探讨孕妇外周血中单个胎儿有核红细胞(Nucleated red blood cell,NRBC)经引物延伸预扩增 (Primer extension preamplification,PEP)后在β地中海贫血无创性产前基因诊断中应用的可行性,试图建立一条新的β地中海贫血无创性产前基因诊断途径。方法:1．新鲜孕妇外周血用淋巴细胞分离液分离到单个核细胞,涂片,干燥,1％联苯胺染色,苏木素复染。400倍光镜下观察识别到NRBC,显微操作器将细胞单个获取。2．PEP法对单个NRBC进行全基因组扩增,产物分装为数份保存备检。3．取待检细胞的一份PEP产物进行短串联重复序列(Short tandem repeat,STR)PCR,根据STR基因型来鉴定所取

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

引物延伸预扩增论文参考文献

[1].韦红英,龙桂芳,刘壮,林伟雄.引物延伸预扩增在β-地中海贫血产前基因诊断中的应用研究[J].中国实用妇科与产科杂志.2007

[2].韦红英,龙桂芳,刘壮,林伟雄,李树全.引物延伸预扩增技术在β地中海贫血无创性产前基因诊断的应用研究[C].中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编.2006

[3].韦红英,龙桂芳,林伟雄,李树全.引物延伸预扩增后STR分型在鉴定母血中胎儿有核红细胞的应用[J].中华血液学杂志.2006

[4].焦泽旭,庄广伦,周灿权,梁晓燕,张敏芳.应用引物延伸预扩增方法对地中海贫血进行植入前遗传学诊断的初步研究[J].中华血液学杂志.2003

[5].马锦琪,盛毅,赵亚南,纪亚忠.引物延伸预扩增用于胚胎种植前诊断的实验研究[J].中国优生与遗传杂志.2003

[6].焦泽旭,庄广伦,周灿权,舒益民,李洁.引物延伸预扩增法应用于β-地中海贫血患者胚胎植入前遗传学诊断——附一例报告[J].中华妇产科杂志.2003

[7].马锦琪,纪亚忠,盛毅,赵亚南.单细胞引物延伸预扩增分析多个基因[J].中华医学遗传学杂志.2001

[8].贺桂芳,马旭,陈汉平.应用引物延伸预扩增反应技术检测孕妇血浆中的胎儿DNA[J].中日友好医院学报.2001

[9].赵庆国,张郁,李丽君,焦保权,朱爱萍.应用引物延伸预扩增提高微量DNA拷贝数[J].生物技术通讯.2000

论文知识图

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