猪IgG1-Fc与圆环病毒3型Cap融合基因的原核表达与分析

论文摘要

为了探索猪Ig G1-Fc（pIgG1-Fc）与猪圆环病毒3型（PCV-3） Cap融合基因在大肠杆菌中的表达效果,试验采用PCR方法扩增pIgG1-Fc-Cap136～645融合基因,通过PCR和双酶切技术鉴定重组质粒pET30a（+）-pIgG1-Fc-Cap136～645,使用SDS-PAGE和Western-blot方法对该重组质粒进行原核表达与鉴定,并进行可溶性分析。结果表明:PCR扩增得到pIgG1-Fc-Cap136～645融合基因,大小为1 221 bp,共编码407个氨基酸,并成功构建重组质粒pET30a（+）-p IgG1-Fc-Cap136～645;该重组质粒在大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中获得表达,表达的融合蛋白分子质量约为53. 0 ku,在25℃、IPTG终浓度为0. 5 mmol/L、诱导8小时时,重组蛋白pIgG1-Fc-Cap136～645的表达量最高,且主要以包涵体形式表达。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 周玲玲,连凯琪,张明亮,王英杰,张慢,宋玉伟,张福良

关键词: 片段,猪圆环病毒型,融合基因,原核表达,可溶性

来源: 黑龙江畜牧兽医 2019年17期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 安阳工学院生物与食品工程学院,河南省兽用生物制品研发与应用国际联合实验室,安阳市生猪重大疫病预防控制重点实验室

基金: 河南省高等学校重点研发项目(19B230001),安阳市科技成果推广项目(2015-33),安阳工学院博士科研启动基金项目(BSJ2016008),安阳工学院校青年科研基金项目(QJJ2018007)

分类号: S852.651

DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.10.0006

页码: 97-100

总页数: 4

文件大小: 255K

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