基于荧光光谱技术研究胶原蛋白溶液中分子的聚集行为

基于荧光光谱技术研究胶原蛋白溶液中分子的聚集行为

论文摘要

对胶原分子聚集行为的研究,不仅能改善其理化特性,同时也为其在食品、组织工程和生物医药等领域的应用提供理论指导。基于胶原分子中苯丙氨酸(Phe)和酪氨酸(Tyr)的内源荧光特性,采用常规波长、同步荧光和二维(2D)荧光光谱技术研究了不同浓度和温度下胶原分子的聚集行为。研究结果表明:(1)在激发波长275 nm条件下,胶原分子仅在发射波长303 nm处出现了归属于Tyr的特征峰;选取波长差(Δλ)为15 nm的同步荧光扫描胶原分子,发现其在261和282 nm处出现了分别归属于Phe和Tyr的特征峰。(2)特征峰的荧光强度与胶原浓度呈现良好的线性关系,表明了基于常规波长和同步荧光光谱技术对胶原定量分析的可行性。(3)随着胶原浓度的增加, Tyr和Phe的含量逐渐增大,且胶原分子间距逐渐降低并聚集成纤维束,使得Tyr和Phe相互靠近并参与形成大量的氢键,从而导致荧光强度不断增大。然而随着温度的升高,荧光基团与溶剂碰撞的猝灭机会增大,且胶原分子中Tyr和Phe的荧光量子产率逐渐降低,同时胶原分子动能增大,其聚集体逐渐松散,其三股螺旋结构逐渐坍塌, Tyr和Phe参与形成的氢键被破坏,从而导致荧光强度随温度的升高不断降低。(4)275 nm常规波长的2D荧光光谱分析表明,胶原分子在297, 303和310 nm处出现了相关峰,其中303 nm归属于Tyr, 297 nm归属于胶原分子聚集过程中参与氢键形成的Tyr; 310 nm可能归属于Tyr的激发态,其不断的蓝移形成稳定的基团,以便参与氢键的形成,从而促进了胶原分子的聚集。以浓度为外扰的基团响应顺序为303 nm>297 nm>310 nm;以温度为外扰的基团响应顺序为297 nm>310 nm>303 nm。(5)2D同步荧光光谱分析表明,随着胶原浓度和温度的升高, Phe均比Tyr优先响应。综上,采用常规波长、同步荧光光谱技术均能较好的研究胶原分子在不同浓度和温度下的聚集行为,且为胶原的定量分析提供了一种新的方法,但同步荧光光谱技术可将量子产率较低的Phe显现出来,体现了其具有窄化谱带和提升分辨率的优点。此外,结合2D荧光分析技术,可进一步研究胶原分子基团的响应顺序。

论文目录

  • 引 言
  • 1 实验部分
  •   1.1 材料与仪器
  •   1.2 方法及数据处理
  •     1.2.1 常规波长荧光光谱
  •     1.2.2 同步荧光光谱
  •     1.2.3 2D荧光光谱分析
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 常规波长的荧光光谱
  •     2.1.1 浓度对胶原分子聚集行为的影响
  •     2.1.2 温度对胶原聚集行为的影响
  •   2.2 同步荧光光谱分析
  •     2.2.1 浓度对胶原分子聚集行为的影响
  •     2.2.2 温度对胶原溶液聚集行为的影响
  • 3 结 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李从虎,吴彦,马兴红,方一帆,张颖,李文娟,田荟琳

    关键词: 胶原,荧光,苯丙氨酸,酪氨酸,聚集

    来源: 光谱学与光谱分析 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 化学

    单位: 安庆师范大学生命科学学院,皖西南生物多样性研究与保护安徽省重点实验室,水生生物保护与水生态修复安徽省高等学校工程技术研究中心,齐鲁工业大学(山东省科学院)皮革学院

    基金: 国家自然科学基金项目(21606139),安徽省自然科学基金项目(1808085QC97),安徽省教育厅科学研究项目(KJ2016A864,KJ2018A0355)资助

    分类号: O657.3;O645

    页码: 2023-2028

    总页数: 6

    文件大小: 986K

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