论文摘要
目的验证幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）粘附素HpaA通过诱导T细胞分泌IL-21加剧其感染后促进胃粘膜损伤及胃癌转移的作用。方法收集56例确诊Hp感染患者临床内窥镜取得的胃粘膜,以及经根治后再次通过内窥镜取得胃粘膜,通过RT-PCR和Western blot比较其IL-21、MMP-2、MMP-9及其基因在Hp感染前后胃粘膜中的表达水平,并克隆构达、纯化粘附素HpaA。取健康未感染成年人外周血PBMC,磁珠分选获得CD3+T细胞。使用重组HpaA刺激分选获得的细胞,采用ELISA试剂盒检测其上清中IL-21的水平。培养胃粘膜AGS细胞系并使用不同手段干预培养环境中的IL-21水平,采用Western blot检测AGS细胞MMP-2及MMP-9的表达。并通过Transwell实验验证IL-21对AGS细胞迁徙的影响。结果 Western blot检测Hp感染患者的胃粘膜中IL-21,MMP-2和MMP-9表达水平显著高于根治后的胃粘膜（P<0.05）。成功构建pET-28a/HpaA重组质粒,表达并纯化的粘附素HpaA能诱导CD3+T细胞分泌高水平的IL-21。AGS细胞试验显示,IL-21诱导AGS细胞MMP-2及MMP-9的表达水平显著升高;使用抗体阻断IL-21以及使用适配子HA6（之前报道的能够特异性结合HpaA的配基）阻断HpaA后MMP-2及MMP-9的表达水平显著下降,且AGS细胞迁徙水平降低。结论粘附素HpaA通过诱导T细胞产生IL-21,继而通过MMP对促进胃粘膜损伤及胃癌转移有重要意义。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 华影,周发友,陈丽萍,李生,唐晓磊
关键词: 幽门螺杆菌,粘附素,白介素,基质金属蛋白酶,转移
来源: 中国病原生物学杂志 2019年12期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 基础医学
单位: 皖南医学院第二附属医院基础实验室,皖南医学院护理学院,皖南医学院第二附属医院消化科,芜湖市第二人民医院消化科
基金: 国家自然科学基金项目(No.81601806)
分类号: R378
DOI: 10.13350/j.cjpb.191208
页码: 1403-1408
总页数: 6
文件大小: 1335K
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