K亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆表达及多克隆抗体的制备

K亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆表达及多克隆抗体的制备

论文摘要

研究分别将K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的gp85基因以及env基因分别克隆到原核表达载体pColdⅠ以及真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证后分别命名为pCold-K-gp85以及pcDNA3.1-K-env。pCold-K-gp85转化BL21大肠杆菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析发现,该Gp85重组蛋白主要表达在包涵体中。利用纯化后Gp85重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了抗ALV-K Gp85蛋白的多克隆抗体。间接免疫荧光以及Western blot试验进一步证明,所获得的抗Gp85蛋白的多克隆抗体能特异性的识别转染pcDNA3.1-K-env质粒以及感染ALV-K的DF-1细胞内表达的Env蛋白。以上研究结果为进一步探究ALV-K宿主范围,细胞受体鉴定及亚群特异性诊断技术研究奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料
  •   1.1 细胞、病毒和试验动物
  •   1.2 载体、菌株和主要试剂
  •   1.3 引物
  • 2 方法
  •   2.1 PCR扩增
  •   2.2 重组质粒的构建
  •   2.3 pCold-K-gp85原核重组质粒的诱导表达及多克隆抗体制备
  •   2.4 抗ALV-K-gp85多抗特异性分析
  • 3 结果
  •   3.1 ALV-K-gp85基因原核及真核表达载体的构建
  •   3.2 ALV-K-gp85蛋白原核表达鉴定及纯化
  •   3.3 抗ALV-K Gp85多克隆抗体反应性的检测
  • 4 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 吕璐,胡明月,邓菁菁,刘勇,李拓凡,谢菁,谢泉,邵红霞,秦爱建,叶建强

    关键词: 亚群禽白血病病毒,基因,多克隆抗体

    来源: 中国家禽 2019年19期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 扬州大学兽医学院禽类预防医学教育部重点实验室江苏省动物预防医学重点实验室,江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州大学农业科技发展研究院,教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室

    基金: 国家重点研发项目(2016YFD0501605),国家自然科学基金中英联合项目(31761133002,BB,R012865,1),大学生实践创新训练项目(X20180643),江苏高校优势学科建设工程资助项目

    分类号: S852.65

    DOI: 10.16372/j.issn.1004-6364.2019.19.011

    页码: 55-58

    总页数: 4

    文件大小: 1172K

    下载量: 113

    相关论文文献

    • [1].禽白血病A亚群病毒gp85的单因子血清制备及其特异性鉴定[J]. 微生物学报 2011(01)
    • [2].K亚群禽白血病病毒gp85单因子血清的制备及其特异性鉴定[J]. 中国畜牧兽医 2016(02)
    • [3].J亚群禽白血病毒gp85基因克隆表达与初步应用[J]. 中国兽医杂志 2010(04)
    • [4].山东五大地方鸡禽白血病病毒主要流行亚型鉴定及其分离株gp85基因的分子特征分析[J]. 畜牧兽医学报 2014(03)
    • [5].禽白血病J亚型病毒分离鉴定及其gp85基因克隆表达[J]. 东北农业大学学报 2013(06)
    • [6].J亚群禽白血病病毒gp85蛋白单克隆抗体的制备和鉴定[J]. 中国家禽 2014(23)
    • [7].J亚群禽白血病病毒gp85单因子血清的制备[J]. 中国畜牧兽医 2011(10)
    • [8].禽白血病J亚群病毒GP85蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 中国兽医杂志 2015(11)
    • [9].不同地区海兰褐蛋鸡中J亚群-禽白血病病毒株gp85基因的分子演化分析[J]. 畜牧兽医学报 2010(05)
    • [10].禽白血病病毒贵州流行株gp85基因的序列分析[J]. 中国家禽 2017(12)
    • [11].J亚群禽白血病病毒gp85基因在毕赤酵母中的分泌表达[J]. 中国畜牧兽医 2012(04)
    • [12].诱发血管瘤型J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与表达[J]. 病毒学报 2011(02)
    • [13].禽白血病病毒gp85蛋白在293T细胞中的表达及分析[J]. 中国家禽 2020(01)
    • [14].安徽省禽白血病感染的血清学调查及gp85基因的扩增[J]. 中国动物传染病学报 2010(03)
    • [15].A亚群禽白血病病毒QC6281株的分离与gp85基因序列分析[J]. 中国兽医杂志 2008(12)
    • [16].2015~2017年湖北地区禽白血病病毒的分离及gp85基因序列分析[J]. 中国家禽 2018(24)
    • [17].A和B亚群禽白血病病毒gp85基因的表达及其抗血清的亚群特异性比较[J]. 中国动物传染病学报 2011(03)
    • [18].浙江省地方鸡种禽白血病毒抗原检测与部分分离株GP85基因序列分析[J]. 浙江农业学报 2020(08)
    • [19].表达J亚群禽白血病病毒gp85蛋白重组表达质粒的免疫原性研究[J]. 中国预防兽医学报 2014(09)
    • [20].J亚群禽白血病病毒gp85单抗1E3株抗原识别表位的初步分析[J]. 中国兽医杂志 2011(12)
    • [21].安徽省五华鸡J亚群禽白血病病毒gp85基因分子序列特征分析[J]. 中国畜牧兽医 2013(11)
    • [22].我国部分地区蛋鸡ALV-J分离株gp85基因遗传进化分析[J]. 中国预防兽医学报 2011(05)
    • [23].J亚群鸡白血病病毒AH09/2株的gp85基因的克隆与原核表达[J]. 中国微生态学杂志 2010(08)
    • [24].黄羽鸡J亚群禽白血病病毒的分离及gp85基因分析[J]. 动物医学进展 2014(02)
    • [25].J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与表达[J]. 动物医学进展 2008(05)
    • [26].J亚群禽白血病病毒安徽分离株的鉴定及其gp85基因序列分析[J]. 中国畜牧兽医 2012(12)
    • [27].广西省2013~2015年ALV-J分离株gp85基因序列分析[J]. 中国动物传染病学报 2016(04)
    • [28].蛋鸡J亚群禽白血病病毒gp85基因遗传进化分析[J]. 福建农业学报 2015(02)
    • [29].J亚群禽白血病病毒gp85基因在重组杆状病毒中的表达及鉴定[J]. 畜牧与兽医 2011(08)
    • [30].J亚群禽白血病病毒gp85蛋白的真核表达纯化及其生物学活性分析[J]. 中国预防兽医学报 2017(10)

    标签:;  ;  ;  

    K亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆表达及多克隆抗体的制备
    下载Doc文档

    猜你喜欢