猪圆环病毒3型衣壳蛋白(Cap)抑制宿主细胞天然免疫应答

猪圆环病毒3型衣壳蛋白(Cap)抑制宿主细胞天然免疫应答

论文摘要

【背景】猪圆环病毒是引起猪圆环病毒病的病原,能够引起严重的免疫抑制和临床症状,给养猪业造成严重的经济损失。【目的】研究猪圆环病毒3型(Porcinecircovirus3,PCV3)衣壳蛋白(Capsid protein,Cap)对宿主天然免疫应答的调控作用,解析其免疫抑制机制对阐明猪圆环病毒致病机制具有重要意义。【方法】通过构建Cap真核表达质粒,利用Westernblotting进行表达验证,实时荧光定量(RT-PCR)、双荧光素酶基因报告系统和ELISA探究Cap对I型干扰素通路活化的影响,通过免疫共沉淀探索其作用机制。【结果】真核表达质粒成功表达并且证实Cap可以抑制DNA模拟物Poly(dA:dT)诱导的I型干扰素通路的活化;Cap可以与天然免疫通路节点分子MITA相互作用。【结论】研究发现PCV3病毒Cap蛋白与干扰素通路节点分子MITA相互作用发挥免疫抑制作用,这为阐明PCV3免疫抑制机制提供了理论依据。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 细胞和质粒
  •     1.1.2 抗体
  •     1.1.3 主要试剂和仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 真核表达质粒的构建
  •     1.2.2 Western blotting检测
  •     1.2.3 RNA提取及c DNA合成
  •     1.2.4 双荧光素酶基因报告系统
  •     1.2.5 实时荧光定量PCR
  •     1.2.6 ELISA实验
  •     1.2.7 免疫共沉淀实验 (Co-IP)
  • 2 结果与分析
  •   2.1 PCV3-Cap真核表达载体的构建
  •   2.2 PCV3-Cap真核表达质粒的表达验证
  •   2.3 PCV3-Cap蛋白对I型干扰素通路活化的影响
  •   2.4 PCV3-Cap蛋白对I型干扰素及相关细胞因子表达的影响
  •   2.5 PCV3-Cap蛋白对cGAS和MITA表达的影响
  •   2.6 PCV3-Cap蛋白与c GAS和MITA相互作用检测
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 赵振翔,朱紫祥,杨帆,曹伟军,李莎莎,康慧,杨孝朴,郑海学

    关键词: 衣壳蛋白,干扰素,信号通路

    来源: 微生物学通报 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 甘肃农业大学动物医学院,中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原学国家重点实验室口蹄疫国家参考实验室

    基金: 国家重点研发计划(2016YFD0500702-2),中国农业科学院前沿探索项目(1610312017003)~~

    分类号: S852.4

    DOI: 10.13344/j.microbiol.china.190156

    页码: 1761-1771

    总页数: 11

    文件大小: 849K

    下载量: 372

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