多重PCR同时检测食品中4种细菌与常见霉菌

多重PCR同时检测食品中4种细菌与常见霉菌

论文摘要

建立一种同时检测食品中金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7以及霉菌的多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。根据金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因(nuc)、沙门氏菌的侵袭正调节蛋白基因(hilA)、大肠杆菌O157:H7鞭毛基因(flic)、单核细胞增生李斯特氏菌的毒力调控蛋白基因(prfA)及霉菌18S rRNA基因V5区分别设计5对特异性引物,并对PCR扩增反应体系和扩增条件进行优化,确定获得特异性良好的PCR扩增产物。而后在37℃对人工污染致病菌的香肠、面包和豆腐进行增菌培养,5种致病微生物在20 h内的检出限均可达到100 CFU/25 g。本实验建立的多重PCR检测方法适用于食品中4种细菌与常见霉菌的同时检测,相较于传统检测方法,具有快速、简便、特异性高的优点。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与方法
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 菌体培养
  •     1.3.2 DNA提取
  •     1.3.3 引物设计
  •     1.3.4 多重PCR体系的建立
  •     1.3.5 多重PCR体系特异性检测
  •     1.3.6 多重PCR体系灵敏度检测
  •     1.3.7 多重PCR检测人工污染食品
  • 2 结果与分析
  •   2.1 多重PCR特异性检测结果
  •   2.2 多重PCR灵敏度检测结果
  •   2.3 人工污染食品的多重PCR灵敏度检测结果
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 熊苏玥,米瑞芳,陈曦,戚彪,李金春,李家鹏,乔晓玲,王守伟

    关键词: 多重聚合酶链式反应,食源性致病菌,霉菌,快速检测

    来源: 食品科学 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 中国肉类食品综合研究中心北京食品科学研究院国家肉类加工工程技术研究中心肉类加工技术北京市重点实验室

    基金: “十三五”国家重点研发计划重点专项(2018YFD0400404)

    分类号: TS207.4

    页码: 305-311

    总页数: 7

    文件大小: 1792K

    下载量: 654

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