检测犬细小病毒和犬瘟热病毒联合PCR/RT-PCR方法的建立及初步应用

论文摘要

为了建立一种能同时检测犬细小病毒（CPV）和犬瘟热病毒（CDV）的快速鉴别PCR方法,试验根据GenBank中登录的CPV NS1基因和CDV F基因序列设计2对特异性引物,通过综合CPV单项PCR方法与CDV单项RT-PCR方法的扩增程序,最后确定出联合PCR/RT-PCR方法的最佳退火温度、延伸时间和循环次数等反应程序,并对扩增产物进行克隆鉴定,同时进行特异性试验、敏感性试验和临床病料的检测。结果表明:建立的联合PCR/RT-PCR方法可以在一个扩增体系内同时检测两种病毒,其最佳联合PCR/RT-PCR扩增退火温度为50.8℃;经特异性分析,联合PCR/RT-PCR方法对犬副流感病毒（CPIV）、狂犬病毒（RV）、犬腺病毒（CAV）的检测为阴性;经敏感性分析,联合PCR/RT-PCR方法在模板浓度稀释到1×100TCID50时仍能见到较清晰的特异性条带;应用联合PCR/RT-PCR方法对延吉市36份犬病料样本进行检测,CPV阳性率为25.00%,CDV阳性率为33.33%,CPV和CDV混合感染阳性率为8.33%。说明试验建立的CPV和CDV联合PCR/RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高,可用于犬细小病毒病和犬瘟热病毒病的临床诊断。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 修占伍,刘晋宇,李远超,孟媛,鲁承,高旭

关键词: 犬细小病毒,犬瘟热病毒,联合,检测,建立,初步应用

来源: 黑龙江畜牧兽医 2019年03期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 延边大学农学院动物医学系

基金: 延边大学科技发展规划项目(602013129)

分类号: S852.65

DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.11.0178

页码: 88-91

总页数: 4

文件大小: 244K

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