PCV3和PCV2双重PCR鉴别诊断方法的建立及应用

PCV3和PCV2双重PCR鉴别诊断方法的建立及应用

论文摘要

本研究根据GenBank中报道的PCV2和PCV3毒株全基因组序列,设计两对特异性引物,建立了一种多重PCR鉴别诊断方法,两种病毒的预期扩增片段分别大小分别为1 007 bp和505 bp。通过对扩增条件的优化,获得最佳的反应体系为25μL体系,最佳退火温度为56℃。该鉴别方法可以同时扩增PCV3和PCV2的特异性片段,而猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、轮状病毒(RV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪德尔塔冠状病毒的基因组及阴性对照均未扩增出任何条带。该方法对PCV3和PCV2的最低检出量均为10 ng/μL。对采自湖北省内规模化猪场的260份淋巴结样品检测。结果显示,PCV3阳性率为16.9%(44/260),PCV2阳性率为46.5%(121/260),PCV3和PCV2混合感染率为4.6%(12/260),双重PCR检测与测序分析的符合率为100%。结果表明,本研究建立了一种简便、灵敏、稳定可靠且特异性强的双重PCR鉴别诊断方法,可为临床样品中PCV3和PCV2的快速鉴别诊断及流行病学研究提供技术支持。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨克礼,焦祖武,郭锐,周丹娜,段正赢,田永祥

关键词: 猪环病毒型,猪圆环病毒型,双重,鉴别诊断,流行病学

来源: 现代畜牧兽医 2019年03期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室

基金: 国家重点研发计划(2016YFD0500703),湖北省农业科技创新中心项目(2016-620-000-001-026),农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室开放课题(2018ZD156)

分类号: S852.651

页码: 1-6

总页数: 6

文件大小: 2285K

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