SIRT1对牦牛卵母细胞体外成熟与老化的影响

SIRT1对牦牛卵母细胞体外成熟与老化的影响

论文摘要

旨在探索SIRT1在牦牛卵母细胞体外成熟与老化过程中的作用。本研究在体外成熟液中分别添加SIRT1特异性激动剂SRT2104 (SRT组)和特异性抑制剂Inauhzin (INZ组),牦牛卵丘卵母细胞复合体(COCs)体外培养24 h后,观察卵丘细胞的扩展和第一极体的排出情况;利用免疫荧光检测体外培养24与36 h后卵母细胞内的ROS水平;采用实时荧光定量PCR法检测体外培养24与36 h后卵母细胞内SIRT1、FOXO3a、SOD2以及Bax的表达水平;体外培养24与36 h后的牦牛卵母细胞进行体外受精,观察并统计其卵裂率与囊胚形成率。结果显示,体外培养24 h,SRT组的卵丘细胞扩展程度显著高于对照组(P<0.05),而INZ组的卵丘细胞扩展程度和第一极体排出率显著低于对照组(P<0.05)。随着体外培养时间的增加,卵母细胞内的ROS水平显著增加(P<0.05);添加SRT2104能显著抑制卵母细胞中ROS水平的积累(P<0.05),而添加Inauhzin则显著上调卵母细胞内的ROS水平(P<0.05)。体外培养24 h后,SRT组SIRT1、FOXO3a与SOD2的表达水平显著高于对照组(P<0.05),但Bax的表达水平显著降低(P<0.05);INZ组的SIRT1、FOXO3a与SOD2表达均显著低于对照组(P<0.05),但Bax的表达水平显著上调(P<0.05)。牦牛卵母细胞体外培养24 h后,SRT组的卵裂率与囊胚形成率显著高于INZ组和对照组(P<0.05);卵母细胞体外培养36 h后,INZ组的卵裂率和囊胚形成率显著低于其他组(P<0.05)。综上表明,SIRT1参与了牦牛卵母细胞的体外成熟,在体外培养液中适当添加SIRT1激动剂,有利于卵母细胞体外成熟及缓解老化,同时改善早期胚胎的发育能力。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 牦牛卵母细胞收集及培养
  •   1.3 评估卵丘细胞的扩展及卵母细胞的成熟
  •   1.4 免疫荧光检测卵母细胞内ROS水平
  •   1.5 抗氧化及凋亡基因表达的检测
  •   1.6 牦牛卵母细胞体外受精与胚胎培养
  •   1.7 数据分析
  • 2 结 果
  •   2.1 SIRT1对牦牛卵母细胞成熟的影响
  •   2.2 SIRT1对牦牛卵母细胞内ROS水平的影响
  •   2.3 SIRT1对牦牛卵母细胞内抗氧化及凋亡基因表达水平的影响
  •   2.4 SIRT1对牦牛卵母细胞后续胚胎发育的影响
  • 3 讨 论
  • 4 结 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 熊显荣,王艳,李键,熊燕,字向东,邱翔

    关键词: 卵母细胞,成熟,老化,牦牛

    来源: 畜牧兽医学报 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 农业科技

    专业: 畜牧与动物医学

    单位: 西南民族大学生命科学与技术学院,青藏高原动物遗传资源保护与利用国家教育部重点实验室,西南民族大学动物科学国家民委重点实验室

    基金: 国家重点研发专项(2018YFD0502304),西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金项目(2019NQN47),青藏高原生态畜牧业协同创新中心开放基金(QZGYXT05)

    分类号: S823.85

    页码: 2440-2448

    总页数: 9

    文件大小: 1845K

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