MiRNA-503胞内转染对大鼠脂肪干细胞成骨分化的影响

MiRNA-503胞内转染对大鼠脂肪干细胞成骨分化的影响

论文摘要

目的探究小分子核糖核酸503(micro ribonucleic acid 503,MiRNA-503)的胞内转染对大鼠脂肪干细胞(adipose stem cells,ADSC)成骨分化的影响。方法提取大鼠腹股沟脂肪组织,分离培养后成骨、成脂诱导分化;鉴定具有成骨、成脂能力ADSC的P2代细胞中转入MiRNA-503的为实验组(N),转入阴性对照核苷酸(Negative control CY3)的为对照组(NC),转染后细胞流式检测两组细胞表面抗体表达及成骨诱导鉴定。结果 ADSC长梭状,呈涡旋式分布,类似成纤维细胞;成骨、成脂诱导比较,成骨诱导组碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色(42.712±4.055)和成脂诱导组油红O染色(47.607±6.604),均高于对照组(7.383±1.840,2.780±0.278),差异有统计学意义(t=13.742,P<0.001;t=11.747,P=0.007)。鉴定具有成骨、成脂能力ADSC P2代进行转染,流式细胞检测显示N组CD29表达量99.8%,CD90表达量99.9%,阳性表面抗原高表达;CD34表达量0.6%,CD45表达量0.4%,阴性表面抗原低表达。NC组CD29表达量99.6%,CD90表达量99.2%;CD34表达量0.3%,CD45表达量0.0%。反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测显示N组表达成骨相关基因RUNX2、BSP、OCN表达均高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。转染后成骨诱导7 d,ALP染色结果显示N组阳性细胞(104.014±13.773)高于NC组(44.111±1.925),差异有统计学意义(t=9.952,P=0.009)。结论 MiRNA-503的胞内转染对ADSC成骨分化具有促进作用。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 实验动物
  •   1.2 实验试剂
  •   1.3 实验仪器
  •   1.4 方法
  •     1.4.1 细胞培养
  •     1.4.2 ADSC进行成骨、成脂诱导
  •     1.4.3 ALP染色
  •     1.4.4 油红O染色
  •     1.4.5 胞内转染
  •     1.4.6 细胞流式检测
  •     1.4.7 成骨诱导鉴定
  •   1.5 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 ADSC形态学观察
  •   2.2 ADSC成骨、成脂染色
  •   2.3 转染后细胞检测
  •     2.3.1 流式细胞检测结果
  •     2.3.2 ALP染色
  •     2.3.3 成骨相关基因检测
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 卓丽丹,李红,郭红延

    关键词: 小分子核糖核酸,脂肪干细胞,胞内转染,成骨分化

    来源: 中华灾害救援医学 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 解放军总医院第三医学中心口腔科,锦州医科大学研究生院,军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所

    基金: 国家自然科学基金资助项目(81571619)

    分类号: R329.2

    DOI: 10.13919/j.issn.2095-6274.2019.02.008

    页码: 91-95

    总页数: 5

    文件大小: 1561K

    下载量: 114

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