应用UTMD技术联合脂质体转染介导人肝癌细胞表达miRNA-122的研究

应用UTMD技术联合脂质体转染介导人肝癌细胞表达miRNA-122的研究

论文摘要

目的:探讨应用超声靶向微泡破坏(UTMD)技术和脂质体介导质粒miRNA-122在人肝癌HCCLM3细胞表达后细胞增殖、迁移和侵袭能力以及耐药性的变化。方法:构建pLMP-miR-122质粒。将对数期肝癌细胞株HCCLM3分组转染:A组(对照组)、B组(脂质体+质粒组)、C组(超声微泡+质粒+超声辐照组)、D组(脂质体+超声微泡+质粒+超声辐照组)。采用荧光定量PCR法检测pre-miRNA-122表达水平比较各组细胞转染效率,以CCK-8法检测细胞活性,应用划痕实验和Transwell实验检测细胞的体外迁移和侵袭能力,蛋白质免疫印迹检测蛋白表达情况。结果:HCCLM3细胞miRNA-122过表达后,细胞的增殖、迁移、侵袭能力与对照组比较均显著受到抑制,且对化疗药物敏感性增加,抗凋亡蛋白Bcl2表达下调。结论:UTMD技术结合脂质体转染法可以提高质粒转染人肝癌细胞HCCLM3效率,并且miRNA-122上调后可以明显抑制HCCLM3增殖、迁移和侵袭能力,有可能成为肝癌基因治疗的新靶点。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验仪器和试剂
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 质粒构建
  •     1.2.2 细胞培养、分组和转染
  •     1.2.3 荧光定量PCR技术检测基因表达水平
  •     1.2.4 CCK-8检测各组细胞活性
  •     1.2.5 体外迁移和侵袭实验
  •     1.2.6 CCK-8检测对化疗敏感性的影响
  •     1.2.7 蛋白印迹(Western blotting)检测抗凋亡蛋白Bcl2的表达
  •   1.3 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 各组细胞转染效率
  •   2.2 miRNA-122抑制HCCLM3增殖
  •   2.3 miRNA-122抑制HCCLM3体外侵袭和迁移能力
  •   2.4 miRNA-122对HCCLM3细胞耐药性的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李艳,罗栩伟,朱冬梅,杨姣,张英娟,张慧,陈思佳,刘刚,刘学彬

    关键词: 超声靶向微泡破坏技术,肝癌,转染,基因治疗

    来源: 川北医学院学报 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 肿瘤学

    单位: 川北医学院第二临床医学院南充市中心医院

    基金: 四川省卫生和计划生育委员会科研课题(18PJ149,16PJ201),四川省教育厅科研计划项目(17ZB0176),南充市应用技术研究与开发资金项目(16YFZJ0024),川北医学院科研发展计划项目资助(CBY17-A-YB19,CBY17-A-YB50,CBY16-A-YB37)

    分类号: R735.7

    页码: 667-671

    总页数: 5

    文件大小: 1101K

    下载量: 118

    相关论文文献

    标签:;  ;  ;  ;  

    应用UTMD技术联合脂质体转染介导人肝癌细胞表达miRNA-122的研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢