拟南芥细胞周期调控因子KRP2的原核表达及蛋白纯化

拟南芥细胞周期调控因子KRP2的原核表达及蛋白纯化

论文摘要

表皮毛是由高等植物地上部组织表皮细胞发育而来的一种特殊结构,细胞周期调控因子在植物表皮毛细胞形态的建成过程中发挥着重要作用。利用原核表达系统,构建pET-28a-KRP2-FLAG融合表达载体,在大肠杆菌中对拟南芥细胞周期依赖激酶抑制因子KRP2进行了体外表达,并利用蛋白标签FLAG和His对目的蛋白进行纯化。结果表明,在大肠杆菌系统中成功对KRP2-FLAG进行了体外表达并得到了纯化的蛋白,蛋白量为0.87 mg。这为进一步研究KRP2在表皮毛细胞发育过程中的作用奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 植物材料、菌株和载体
  •     1.1.2 试剂
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 拟南芥KRP2基因片段克隆
  •     1.2.2 重组蛋白的诱导表达
  •     1.2.3 重组蛋白的纯化
  • 2 结果与分析
  •   2.1 拟南芥KRP2目的基因片段克隆
  •   2.2 原核表达载体pET-28a-KRP2的鉴定
  •   2.3 重组蛋白的诱导表达
  •   2.4 KRP2-FLAG重组蛋白的纯化
  • 3 讨论与结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 杨旭颖,安丽君

    关键词: 表皮毛,细胞周期调控因子,原核表达,标签,蛋白纯化,拟南芥,基因克隆,重组蛋白

    来源: 江苏农业科学 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 旱区逆境生物学国家重点实验室/西北农林科技大学生命科学学院

    基金: 国家自然科学基金(编号:31470290),中央高校基本科研业务费项目(编号:2014YB036,Z109021537)

    分类号: Q942

    DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.12.012

    页码: 63-65

    总页数: 3

    文件大小: 223K

    下载量: 434

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